第五章 化学发光分析[精选].pptVIP

第五章 化学发光分析 什么是化学发光（chemiluminescence）？ 化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。根据化学发光的强度测定物质含量的分析方法叫化学发光分析。 1、不需光源，避免了杂散光的干扰； 2、检测灵敏度高； 3、仪器设备简单、操作简便。 ? 特点： BPCL 常见化学发光的类型： A. 自身化学发光反应：被测物质为反应物直接参与化学反应，利用自身化学反应释放的能量激发产物分子的光辐射。 B. 敏化化学发光反应：是指某些化学反应中的由于激发态产物本身不发光或发光十分微弱，但通过加入某种能量接受体（荧光剂）可导致发光。 常见的化学发光体系 1、鲁米诺化学发光体系 根据所用的氧化剂不同，Luminol体系又可以分为不同的反应体系，如：Luminol-H2O2体系、Luminol-KMnO4体系、Luminol-I2体系、Luminol-KIO4体系和Luminol-K3[Fe(CN)6]体系等。其中，应用最为广泛的是Luminol-H2O2体系。 CL system Analyte Detection limit Luminol-H2O2-HRP H2O2 4 μM Luminol-H2O2-HRP H2O2 8 μM Luminol-H2O2-HRP Fe (II) 0.5 pM Luminol-H2O2-HRP Cu (II) 1.5 μg/L Luminol-H2O2-HRP（CE/FIA） Co (II) 0.5 pM Luminol-H2O2-quinine Cr (VI) 1.2 mM Luminol-H2O2-EDTA Cr (III) 0.16 fM Luminol-H2O2 Ag (I) 270 nM Luminol-H2O2-SnCl2 Hg (II) 0.8 μg/L Luminol-H2O2-Cu（LC） 阿米卡星 50 μg/L Luminol-H2O2 (FIA) 雌激素 51 nM Luminol-H2O2 (FIA) 卡托普利 2 μg/L Luminol-H2O2 (FIA) 甲状腺激素 27 μg/mL Luminol-H2O2 (SIA) 烷基苯磺酸酯类 70 pM 2、过氧化草酸酯化学发光（PO-CL）体系 3、吖啶酯CL体系 4、碱性磷酸酯酶（ALP）化学发光体系 ALP能够催化磷酸单酯、磷酸核苷以及磷酸糖类等的水解，在释放磷酸盐的同时，生成相应的醇、酚或胺。 ALP应用最为广泛的底物为金刚环氧磷酸（AMPPD）。 AMPPD在碱性条件下，被AP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子，其有2～30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续性光，在15min时其强度 达到高峰，15～60min内光强度保持相对稳定。 示例: 化学发光 免疫分析 ＋ 化学发光免疫分析