过氧化氢酶活性的测定[精选].pptVIP

实 验 三 过氧化氢酶活性的测定 ——碘量法 生物体内重要的三种氧化酶类，其作用均是清除体内自由基： POD：过氧化物酶 SOD：超氧化物歧化酶 CAT：过氧化氢酶 一、实验目的： 1、掌握碘量法测定过氧化氢酶活性的原理和方法； 2、了解过氧化氢酶的作用。 二、实验原理: 植物在逆境下或衰老时，由于体内活性氧代谢加强而使H2O2发生累积。H2O2可进一步生成氢氧自由基（OH˙）。 氢氧自由基（OH˙）是化学性质最活泼的活性氧，可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并且有非常高的速度常数，破坏性极强，可使细胞膜遭受损害，加速细胞的衰老和解体。 过氧化氢酶(catalase；CAT)可以清除H2O2、分解氢氧自由基，保护机体细胞稳定的内环境及细胞的正常生活，因此CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植物的抗逆性密切相关。 二、实验原理: CAT活性大小以一定时间内分解的H2O2量来表示： 在一定条件下，CAT能把H2O2分解为H2O和O2。当CAT与H2O2反应一定时间(t)后，再用碘量法测定未分解的H2O2，以钼酸铵作催化剂，H2O2与KI反应，放出游离碘，然后用硫代硫酸钠滴定碘，反应式为： H2O2（余）+2KI+H2SO4----→I2+K2SO4+2H2O I2