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- 2017-01-21 发布于浙江
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【2017年整理】细胞分子生物学基础
细 胞 分 子 生 物 学
第一章
1、细胞学说:
德国植物学家M.J.Schleidon(1838)和动物学家T.Schwann(1839)根据前人的工作和自己的研究成果,结论性地提出关于生物结构的学说,主张:一切生物都是由一个或多个细胞构成;细胞是生命的结构单位;细胞只能由细胞分裂而来。
第二章
1、福尔根反应的原理:
由Feulgen和Rossenbeck (1924)发明,对DNA的反应具有高度专一性。
其原理是: 标本经稀盐酸水解后,DNA分子中的嘌呤碱基被解离,从而在核糖的一端出现了醛基。Schiff试剂中的无色品红与醛基反应,形成含有醌基的化合物,醌基为发色团,呈现出紫红色。
2、免疫细胞化学的原理:
免疫细胞化学是根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原结合,对抗原进行专一定位测定的技术。
如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。
3、免疫荧光技术:
如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。标记荧光素的称为免疫荧光法(immunofluorescent technique),常用的萤光素有异硫氰酸荧光素(FITC)、罗丹明(rhodamine)等。
4、放射自显影技术:
放射性同位素发射出的各种射线能使照相乳胶中的溴化银晶体还原(感光) 。利用放射性物质使照相乳胶膜产生该物质自身影像的技术,称为放射自显影术。
5、细胞培养、原代培养、细胞株的概念:
细胞培养:细胞培养技术(cell culture)或称组织培养技术即是选用各种最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术。
原代培养:从动物机体取出的进行培养的细胞群。原代培养的细胞生长比较缓慢,而且繁殖一定的代数后(一般10代以内)停止生长,需要从更换培养基。
细胞株:从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群,能够繁殖50代左右,在培养过程中其特征始终保持。
6、细胞融合的方法:
真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)。
目前诱导细胞融合的方法有三种:1. 病毒介导的细胞融合(如仙台病毒)
2. 化学介导的细胞融合(如PEG)
3. 电激介导的细胞融合
第三章
1、细胞进行生命活动的应具备的最基本的要素:
(1) 具有一套基因组; (2) 具有一层细胞质膜; (3) 具有一套完整的代谢机构。
2、细胞区别于无机界的最主要的特征: ① 在结构上具有自我装配的能力;
② 在生理活动中具有自我调节的能力;
③ 在增殖上具有自我复制的能力。
3、原核细胞与真核细胞的主要区别:
要 点
原 核 细 胞
真 核 细 胞
大小
大多数很小(1~10um)
大多数较大(10~100um)
细胞核
无膜包围,称为拟核
有双层膜包围
染色体形状
数目
组成
DNA序列
环状DNA分子
一个基因连锁群
DNA裸露或结合少量蛋白质
无或很少重复序列
核中的为线性DNA分子; 线粒体和叶绿体中的为环状DNA分子
两个或多个基因连锁群
核DNA同组蛋白结合; 线粒体和叶绿体中的DNA裸露
有重复序列
运动细胞器
由鞭毛蛋白丝构成简单鞭毛
由微管构成鞭毛和纤毛
细胞壁
肽聚糖、蛋白质、脂多糖、脂蛋白
植物细胞具有纤维素壁
营养方式
吸收,有的行光合作用
吸收、光合作用、内吞
基因表达
RNA和蛋白质在同一区间合成
RNA在核中合成和加工; 蛋白质在细胞质中合成
细胞分裂
二分或出芽
有丝分裂或减数分裂
内 膜
无独立的内膜
有, 分化成细胞器
细胞骨架
无
普遍存在
呼吸作用和光合作用酶的分部
质 膜
线粒体和叶绿体(植物)
核糖体
70S(50S+30S)
80S(60S+40S)
4、朊病毒:
1982年S.B. Prusiner在患羊搔痒病的羊体内发现了一种蛋白质因子,是羊搔痒病的致病因子,它将其命名为prion(pr, protein; i, infectious; on, 基本单位)。蛋白质感染因子),也有人译为‘朊病毒’。
5、核酶: RNA催化剂,具有催化性能的RNA。
第四章
1、流动镶嵌模型如何描述细胞膜结构:
脂类双分子层构成了膜的网架,脂类分子在膜中的位置并非固定不变,具有动态流动性;
蛋白质分子不同程度地镶嵌在脂双层网架中,根据镶嵌程度不同可将膜蛋白分为膜整合蛋白和边周蛋白。整合蛋白靠α-螺旋或#61538;-折叠构象插入到脂双层中,而边周蛋白靠化学键或吸附结合到膜的内表面或外表面。膜蛋白在膜中的位置并非固定不变,
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