第七讲蛋白质的生物合成研究报告.ppt

* * * * * * * * * * * * * 多肽链的延长包括进位、转肽-肽键的形成和移位等过程。延长过程需要一系列延长因子和GTP及Mg2+参与。 当释放因子与终止密码子识别后，会使转肽酶活性转变为水解活性，进而使mRNA与核糖体分离，释放合成的多肽链，完成蛋白质的生物合成。 其实，蛋白质的生物合成是以多核糖体循环进行的，它大大提高了翻译的效率。 蛋白质合成后，需要进行一系列的加工与修饰过程，包括氨基端和羧基端的修饰、共价修饰、亚基的聚合和水解断链等。 请阐述蛋白质生物合成的基本过程，并比较原核生物与真核生物之间的主要区别。 作 业 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 图7-10 真核生物翻译起始示意图 多肽链的延长 （1）为密码子所特定的氨基酸tRNA结合到核蛋白体的A位，称为进位：氨基酰tRNA在进位前需要有三种延长因子的作用，即热不稳定的EF-Tu,热稳定的EF-Ts以及依赖GTP的转位因子。EF-Tu首先与GTP结合，然后再与氨基酰tRNA结合成三元复合物，这样的三元复合物才能进入A位。此时GTP水解成GDP，EF-Tu和GDP与结合在A位上的氨基酰tRNA分离（图7-11）。 图 7-11 原核生物肽链延长因子EFTu与GTP的作用原理 （2）转肽--肽键的形成：在70S起始复合物形成过程中，核糖核蛋白体的P位上已结合了起始型甲酰蛋氨酸tRNA，当进位后，P位和A位上各结合了一个氨基酰tRNA，两个氨基酸之间在核糖体转肽酶作用下，P位上的氨基酸提供α-COOH基，与A位上的氨基酸的α-NH2形成肽键，从而使P位上的氨基酸连接到A位氨基酸的氨基上，这就是转肽。转肽后，在A位上形成了一个二肽酰tRNA（图7-12）。 图7-12 肽键的形成 ①核蛋白体“给位”上携甲酰蛋氨酰基的tRNA ②核蛋白体“受体”上新进入的氨基酰tRNA; ③失去甲酰蛋氨酰基后，即将从核蛋白体脱落的tRNA; ④接受甲酰蛋氨酰基后已增长一个氨基酸残基的肽键 （3）移位：转肽作用发生后，氨基酸都位于A位，P位上无负荷氨基酸的tRNA就此脱落，核蛋白体沿着mRNA向3’端方向移动一组密码子，使得原来结合二肽酰tRNA的A位转变成了P位，而A位空出，可以接受下一个新的氨基酰tRNA进入，移位过程需要EF-G，GTP和Mg2+的参加（图7-13）。 图7-13 大肠杆菌蛋白质合成的延伸过程 以后，肽链上每增加一个氨基酸残基，即重复上述进位，转肽，移位的步骤，直至所需的长度，实验证明mRNA上的信息阅读是从5’端向3’端进行，而肽链的延伸是从氨基端到羧基端。所以多肽链合成的方向是N端到C端。 无论原核生物还是真核生物都有三种终止密码子UAG，UAA和UGA。没有一个tRNA能够与终止密码子作用，而是靠特殊的蛋白质因子促成终止作用。这类蛋白质因子叫做释放因子，原核生物有三种释放因子：RF1，RF2和RF3。RF1识别UAA和UAG，RF2识别UAA和UGA。RF3的作用还不明确。真核生物中只有一种释放因子eRF，它可以识别三种终止密码子。 翻译的终止及多肽链的释放 不管原核生物还是真核生物，释放因子都作用于A位点，使转肽酶活性变为水解酶活性，将肽链从结合在核糖体上的tRNA的CCA末端上水解下来，然后mRNA与核糖体分离，最后一个tRNA脱落，核糖体在IF-3作用下，解离出大、小亚基。解离后的大小亚基又重新参加新的肽链的合成，循环往复，所以多肽链在核糖体上的合成过程又称核糖体循环(图7-14)。 图7-14 大肠杆菌蛋白质合成的终止过程 上述只是单个核糖体的翻译过程，事实上在细胞内一条mRNA链上结合着多个核糖体，甚至可多到几百个。蛋白质开始合成时，第一个核糖体在mRNA的起始部位结合，引入第一个蛋氨酸，然后核糖体向mRNA的3’端移动一定距离后，第二个核糖体又在mRNA的起始部位结合，向前移动一定的距离后，在起始部位又结合第三个核糖体，依次下去，直至终止。 多核糖体循环 两个核糖体之间有一定的长度间隔，每个核糖体都独立完成一条多肽链的合成，所以这种多核糖体可以在一条mRNA链上同时合成多条相同的多肽链，这就大大提高了翻译的效率（图7-15）。 图7-15 多核糖体循环 多聚核糖体的核糖体个数，与模板mRNA的长度有关，例如血红蛋白的多肽链mNRA编码区有450个核苷酸组成，长约150nm 。上面串连有5-6个核糖核蛋白体形成多核糖体。而肌凝蛋白的重链mRNA由5400个核苷酸组成，它由60多个核糖体构成多核糖体完成多肽链的合成。 （1）氨基端和羧基端