双功能siRNA对乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用.docVIP

扬州大学 硕士学位论文 双功能siRNA对乙型肝炎病毒（HBV）的抑制作用 姓名：闫飞 申请学位级别：硕士 专业：遗传学 指导教师：孟松树；陈忠斌 201105  闫飞：双功能???砸倚透窝撞《???的抑制作用 ?镏荽笱В??昭镏荩????痪?乱窖Э蒲г海?本????? 摘 要 ?????．??????????琑????筊??与位于线粒体外膜的衔接蛋白干扰素启动 ????，???龋?盏糏型??痛傺滓蜃拥谋泶锖头置冢?佣?迪忠种艸? ????? 时?．???訦??．???赴?尴灾?拘裕??窃???时????对????．?  抗病毒活性测定发现，在????．?细胞中，与???笻?活性相比，???? ?％和?．?ァ??ズ???％、?．?ズ???％；当共转染??甀和?．???保??畇?? 对???和???囊种坡史直鹗???％和?％、?．?ズ???％、?．?ズ???％。与 综上所述，本研究成功设计了一种新型双功能抗??怂嵋┪??畇??，一方面具 宿主细胞??甀依赖的抗病毒天然免疫反应，从而高效阻止??粗啤？笻?双功能 关键词：乙型肝炎病毒?琕?籹??；基因沉默；??甀  闫飞：双功能???砸倚透窝撞《???的抑制作用 ????????? ? ?甋．?????篩? ?? ??．???? ?? ???????? ????? ???? ??? ????????? ????．? ??? ?????????????·??????????? ?? ?? ????? ?????． ??? ??狪??? ???????疌????? ??? ????? ? ? ???琤??? ?? ?? ????? ?? ? ? ??????? ??? ????????． ? ???? ????畇?? ?? ?? ??? ????? ?? ??????? ????  ??，???? ??? ? ??????? ?? ??狟????????? ?? ????? ?????．????????猻?? ???????誻??甿 ??? ? ?????????? ????? ?? ??? ?? ????? ???琀? ??琣? ??????．??????????? ??血? ????篴?? ?????? ????? ???．????％，?．??? ??????????????????????? ????⑽鰉 ????? ??????? ?????????? ?—???? ????．???? ?? ??? ?  缩写 ??????—????? ?? ? 乙型肝炎病毒表面抗原 ? ??．?????? ??? ????? ??? ???? ??? ????????? ??? ? ?? ????? ????? 聚偏氟乙烯 ??? ?? ?疦，??琋’?????????? ??? ?? ??? 脱氧核糖核酸 辣根过氧化物酶 增强型化学发光底物  闫飞：双功能???砸倚透窝撞《???的抑制作用 三 ???．???．．??可以结合并活化Ⅺ???荘?．．?赜械呐涮濉????俊??等?叼首先报 道体外转录产生的???虻チ碦?????H胂赴?锌捎盏糏型干扰素，他们认为这两 种???’??末端是诱导?透扇潘氐墓丶?????取?】也报道体外转录产生的?．?疉可 以诱导?透扇潘夭???欢?赴?酥胁????甊?在释放到胞质前需要进行加工修饰等， 失去??．?涮寤钚浴?捌。由此可见，天然免疫系统能够识别体外转录产生的?．???，??～。 ???????琑??现象，由?????? 虽然在哺乳细胞中发现??仅数年时间，但是??作为一种高效的序列特异性基因剔 与其部分互补，或者是外源性??圆《靖腥镜姆绞酱シ⒘怂拗髅庖叽ǜ性??】。这些脱 既保持了沉默功能，又消除了脱靶效应。 新发现的双功能???????????虺??猻???梢韵?齭??的脱靶现象 【?俊??????唤龀聊?匾煨曰?虮泶铮??壹せ頡?．．?榈嫉腎型干扰素通路。???? 的双重功能相互独立又相互促进，这种具有沉默特异性基因和激活天然免疫应答功能的 ??．?砌?的生物合成 ????是一类具有???龊塑账???奶厥鈊??分子，具有特征性结构， 即?．．???男蛄杏氚衜??蛄芯哂型?葱裕???畇??的双链均由???个磷酸基团  臂 臂 臂 ? ? ? ? ? ??? ??? ??? ??????? ????主要是以带有细菌噬菌体启动子的寡核苷酸链为模板，在体外转录聚合酶的作用 体外转录聚合酶是细菌噬菌体???酆厦福??懿??呋钚缘膕??????。 体外转录生成的????可以沉默特异性基因的表达。在细胞质中，????结合 一个核酶复合物从而形成??盏汲聊?春衔???甶??? 基因表达作用。 ?? ??