白三烯B4对人破骨细胞直接分化和激活功能的实验研究..doc

白三烯B4对人破骨细胞直接分化和激活功能的实验研究 2005年09月27日 中华风湿病学杂志 2005 Vol.9 No.6 P.342-345 6 （北京）为了探讨白三烯(LT)B4能否不依赖细胞核因子κB受体激活剂配体(RANKL)直接促进人破骨细胞的分化和激活，研究者阳性对照组用25 ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和30 ng/mlsRANKL来诱导人外周血单核细胞的培养，实验组用25 ng/ml M-CSF和10-9、10-8、10-7 mol/L LTB4来诱导。通过抗酒石酸磷酸酶(TRAP)染色及10 mm×10 mm玻片上多核性TRAP染色(+)的破骨细胞样细胞计数，来确定LTB4的直接分化作用，并与RANKL的作用比较。通过甲苯胺蓝染色10 mm×10 mm牛皮质骨片上的骨质吸收陷窝并计数，来确定LTB4直接功能激活作用，并与RANKL的作用比较。结果当M-CSF存在时，LTB4能够直接分化人外周血单核细胞为破骨细胞样细胞，并能激活其骨质吸收功能。且随LTB4浓度的增加而增强，但要弱于RANKL。可见LTB4对人破骨细胞有不依赖RANKL的直接分化和激活作用。 日期：2005年9月28日 - 来自[骨科]栏目 骨质疏松的发病机制 ?　　骨质疏松是一种骨密度下降，骨组织微结构和超微结构破坏，导致骨脆性增加的全身性疾病。在整个生命周期中，骨质在不停的形成（成骨）和破坏（破骨），维持着一种动态平衡。骨质疏松的基本病理机制就是在骨代谢中，骨代谢与骨形成的偶联中出现缺陷。现将骨质疏松的病理机制从中、西医及分子水平上加以阐述 ［1］? 。???? 　　1 骨质疏松的病因机制??? 　　通常，人们从峰值骨量获得及净骨丢失率两个方面来探讨骨质疏松的发病机理。一般来说，低峰值骨量结合高骨丢失率可导致骨质疏松。而骨质疏松的形成还与以下几方面有关。 　　1.1 激素的调控因素??? 　　1.1.1 雌激素 经研究表明 雌激素缺乏会引起骨髓改变，促进破骨细胞的形成 ［2］? 。新近提出雌激素可降低骨髓的信号强度阈值，有利于在靠近骨髓的骨组织启动保存方式骨重建而保留骨组织 ［3］? 。??? 　　1.1.2 甲状旁腺激素（PTH） 甲状旁腺素是维持成骨细胞和破骨细胞数量相对平衡并保持其功能偶联的激素。Whitfield等认为它是一段氨基酸残基片断，刺激人类和动物骨的生长。阿肯色大学研究证明，PTH可阻止成骨细胞的凋亡。纽约Helen Hayes医院指出PTH可加速骨重建的过程。??? 　　1.1.3 甲状腺激素 甲状腺激素对成骨细胞的影响是通过直接与成骨细胞受体和膜受体结合而发挥细胞效应，而对破骨细胞需再IL-6的参与下完成。甲状腺功能减退发生低转换性骨质疏松，还与降钙素有关。甲亢则发生高代谢性骨质疏松 ［4］? 。??? 　　1.1.4 糖皮质激素 糖皮质激素抑制成骨细胞增殖及分化，促进成骨细胞的凋亡，抑制破骨细胞的生成，但是否影响破骨细胞的活性尚未明确 ［5］? 。??? 　　1.1.5 雄性激素 研究表明，男性70岁后由于雄激素水平下降，也易导致骨质疏松，可用雄性激素替代疗法［6］? 。??? 　　1.1.6 降钙素（CT） CT直接作用于破骨细胞上的受体，抑制破骨细胞的活性，抑制骨吸收。CT分泌不足时，PTH分泌增多，引起骨脱钙，反过来抑制PTH的分泌，最终发展为骨质疏松 ［7］? 。??? 　　1.2 营养因素 如摄钙量低，微量元素缺乏，维生素（特别是维生素D）缺乏，钙磷代谢紊乱等都会导致骨质疏松。 　　1.3 疾病和药物因素 一般继发性骨质疏松是由于疾病和药物引起的，如型糖尿病表现为低转换型骨质疏松，成骨功能缺陷，破骨功能活性增强，常见疾病还有肠胃病、骨病等。常见药物有肝素、巴比妥类。??? 　　1.4 其他 运动、日光、种族、遗传、年龄、性别、孕娠等都与骨质疏松有关。??? 　　2 分子水平上看骨质疏松的病因??? 　　（1）骨的无机成分钙沉淀不完全或脱钙亢进 ［8］? 。（2）以型胶原为主要成分的骨支持蛋白质的分解亢进 ［8］? 。李梅等综述了型胶原基因突变及SP1位点的多态性与胶原含量及结构相关 ［9］? 。并有实验初步显示了参与骨胶原降解的主要是破骨细胞溶酶体组织蛋白酶 ［8］? 。（3）目前研究颇多的是局部控制因子，如果这些局部因子紊乱，造成骨形成失衡，骨吸收超过骨形成引起骨质疏松。例如，IL-6刺激破骨细胞的形成，促进其分化，增加其活性，导致骨吸收。IL-1刺激骨吸收，抑制成骨细胞增殖，加强骨溶解作用，放大骨吸收作用。TNF-α，TNF-β，CSF，GM-CSF等刺激骨 吸收。IGF-1刺激原有破骨细胞，使活性增强，促进骨吸收，且对破骨细胞的分化有促