07-基因工操作3.pptVIP

重组DNA连接、转移、筛选与鉴定 连接： 两个具有平末端的双链DNA分子连接。 问题：低效率、串珠现象； 利用末端转移酶在载体及外源双链DNA的3‘端各加上一段寡聚核苷酸,如dA(dG)和dT(dC),制成人工粘性末端； 然后在DNA连接酶的作用下, 连接成为重组的DNA分子。 重组DNA连接--同聚物加尾法 将人工合成的或来源于现有质粒的一小段DNA分子(在这一小段DNA分子上有某种限制性内切酶的识别序列), 加到载体或外源DNA的分子上, 然后通过酶切制造粘性末端，再进行连接的方法。 连接反应体系（20μl）： 重组DNA连接、转移、筛选与鉴定 重组 DNA 导入宿主 接合 (conjugation）：当细胞之间、细菌间通过菌毛相互接触时，质粒DNA 从一个细胞(细菌) 至另一细胞(细菌)的转移。 转导（transduction）：???当病毒（噬菌体）从被感染的(供体)细胞释放出来、再感染另一(受体)细胞时，发生DNA转移及基因重组。 转座(transposition )：有些基因可以从一个位置移动到另一位置，由可移动的DNA 序列（插入序列和转座子）介导。 基因转移过程中，不同DNA分子间发生的共价连接称基因重组。 包括位点特异性的重组（整合酶催化）和 同源重组两种类型。 发生在同源序列间的同源重组，又称