第6章++工单倍体的产生+讲义.do.docVIP

第六章 单倍体的产生所谓单倍体，指的是具有配子染色体数的个体或细胞一倍体：只含有一个染色体组的个体或细胞）一倍体不能进行减数分裂,所以是不育的二倍体：含有二个染色体组的个体或细胞三倍体：具有三个染色体组的细胞或个体四倍体：具有四个染色体组的细胞或个体多倍体：细胞或个体中的染色体组数多于二个整倍体体细胞内含有完整的染色体组的类型称为整倍体非整倍体如果在二倍体的基础上，增加或减少个别染色体，这种变异的细胞或个体叫非整倍体在遗传研究和 （1）在单倍体细胞中染色体组，表现型和基因型一致，一旦发生突单倍体植株中由隐性基因控制的性状,虽经染色体加倍但由于没有显性基因的掩盖而容易显现。在诱导频率较高时，单倍体能在植株上较充分地显现重组的配子类型，可提供新的遗传资源和选择材料。 （2）在品种间杂交育种程序中，通过F代花药培养得到单倍体植株后，经染2个世代，和常规育种方法相比，显著缩短了育种年限。 1.3获得单倍体植株的途径 单倍O.001％～001％，因此以前它们并未得到广泛的利用。20世纪60年代中期花药培养获得了大量花粉起源的单倍体其中包括不少通过花药培养产生单倍体的 花药和花粉培养都指在合成培养基上，改变花粉的发育途径，使其不形成配子，而像体细胞一样进行分裂、分化，最终发育成完整植株。只不过后者是将花粉从花药中游离出来，成为分散或游离态进行培养。从组织器官角度来说，花药培养属于器官培养的范畴，而花粉培养属于细胞培养的范畴。但两者的目的都一样，就是要诱导花粉细胞发育成单倍体植株。 花药(anther)是植物花的雄性器官，包括二倍性的药壁和药隔组织以及单倍性的雄性性细胞—花粉粒(pollen grain)。一个花药的每个花粉囊中都充满了花粉粒，每个花粉粒在母体植 2.1活体小孢子发育途径 一个花粉母细胞经过连续2次细胞分离（第一次减数分裂，第二次有丝分裂），形成4个子细胞，称为四分体，四分体分散成单核花粉粒。在正常情况下，单核经第一次有丝分裂，产生一个大而疏松的营养核和一个小而致密的生殖核，称二核花粉粒。第二次有丝分裂仅限于生殖核，形成两个精子，它们处在花粉或花粉管中(图6－1D) ，称为三核花粉粒。最后花粉粒进一步膨大，花粉进入成熟期。 2.2离体小孢子发育途径 在离体培养条件下，花粉是产生花粉植株的原始细胞，我们把花粉形成植株的途径称为“花粉孢子体发育途径”。目前，多数学者习惯把小孢子或花粉沿孢子体途径发育成花粉植株的过程称为“雄核发育”。离体培养时，小孢子在培养过程中呈现不同的发育模式。目前，一般根据小孢子第一次有丝分裂的情况将雄核发育分为A途径(不均等分裂)和B途径(均等分裂)，其中A途径又根据第二次分裂及其以后的情况细分为A-V途径、A-G途径、A-VG途径(又称E途径)及C途径(图6-1)。 图5—1小孢子正常发育途径与离体培养条件下胚胎发育途径比较 A．第一次有丝分裂为非均等分裂，形成一个营养核、一个生殖核 A－V．营养核重复分裂而生殖核败育 A－G．生殖核重复分裂而营养核败育 A－VG．生殖核和营养核共同分裂 C．营养核、生殖核分别或同时进行核内复制，有丝分裂后核融合分别形成二倍体、三倍体、四倍体胚 B．第一次有丝分裂为均等分裂，形成两个相似的营养型核，进而重复分裂形成单倍体胚或先核融合然后重复分裂形成多倍体胚 D．自然条件下小孢子的第二次分裂、淀粉粒及萌发形成的花粉管 2.2.1 A途径 小孢子的第一次有丝分裂按配子体方式进行，为不均等分裂，形成营养细胞和生殖细胞(或营养核和生殖核)，这种途径又可细分为以下几种途径： (1)A-V途径 多细胞花粉(或多核花粉)由营养细胞重复分裂衍生而成，生殖细胞以游离核的形式存在一个周期后退化，或分裂一至数次存在于多核花粉的一侧，有的甚至到球形胚形成仍存在。因此，生殖核并不参与花粉孢子体的形成，在花粉中往往可以观察到生殖细胞的存在。 (2)A-G途径 生殖细胞进行多次分裂形成胚状体，营养细胞不分裂或者仅分裂数次形成胚柄结构。由生殖细胞形成的细胞群其核致密，染色后着色较深，容易同营养细胞衍生而来的细胞群区分开来。 (3)A-VG途径(又称E途径) 花粉内的营养细胞和生殖细胞独立分裂，形成两类细胞群，各群的子细胞都类似其母细胞。 (4)C途径 在获得的花粉植株群体中，除单倍体外，常有相当比例的二倍体、三倍体、四倍体、非整倍体等非单倍体植株，即出现小孢子培养过程中染色体自发加倍现象。1977年，Sunderland提出C途径，即生殖细胞和营养细胞通过核融合后共同形成多细胞花粉，产生非单倍体植株。此途径中生殖核与营养核共同参与了花粉植株的形成。 2.2.2 B途径 小孢子第一次有丝分裂为均等分裂，形成两个大小相近的细胞(或游离核)。以后，由这两个细胞(或游