细胞培养-工1.pptVIP

荧 光 素 酶 检 测 仪 超声波细胞破碎仪 液 氮 罐 程 序 降 温 盒 细胞培养用器皿 培养皿 培养瓶 培养板 冻存管 培养皿 培养瓶 培养板 冻存管 2.1.3清洗、包装与消毒 清洗目的——清除杂质和微生物，使器皿 内不残留任何影响细胞生长 的成分。 玻璃制品 橡胶制品 塑料制品 G6除菌滤器 不锈钢除菌滤器 玻璃器皿的清洗 浸泡： 清水浸泡或刷洗 5%盐酸（过夜） 刷洗： 洗洁剂刷洗 流水冲洗15~20遍 烘干 泡酸： 清洁液浸泡（24小时） 冲洗： 流水冲洗15~20遍 双蒸水冲洗5遍 纯水冲洗一遍 橡胶制品的清洗 新购置的橡胶制品 2%NaOH （煮沸15分钟） 流水冲洗 1%HCl 流水冲洗 蒸馏水煮沸20分钟 晾干 （煮沸30分钟） 塑料制品的清洗 用后流水冲洗 纱布或棉签+洗洁剂刷洗 2%NaOH浸泡过夜 流水冲洗 5%HCl浸泡30min 流水冲洗 蒸馏水冲洗 包装 牛皮纸,皱纹纸,锡箔纸,棉布, 铝饭盒,不锈钢消毒筒等 消毒 物理灭菌法 紫外线消毒 电离辐射消毒 湿热消毒 干热消毒 过滤除菌 化学消毒法——75%酒精，1‰新洁尔灭， 甲醛，环氧乙烷，戊二醛等 紫外线消毒 适用范围：空气、操作台面、其他方法不能进行消毒 的培养器皿 优点：直接照射，方便，效果好 作用机制：直接——破坏微生物的核酸和蛋白质 间接——照射产生臭氧杀死微生物 要求：室内清洁无尘，h灯-地面≤2.5m，消毒物品勿 相互遮挡 电离辐射消毒 适用范围：消毒量大，不适于做高压或滤过等培养用品 优点：灭菌时物品不升温， 可直接对密封包装的物品进行灭菌 注意：电离辐射诱变能力强，不适合消毒活的生物材料 方式：2.5百万拉德60Co产生的γ射线照射48~72hr 大于5百万电子伏特的高能电子束照射 湿热消毒 适用范围：广泛 优点：效果最好 方式：常规——101.3kPa(121.3℃) 20min. 干热消毒 适用范围：主要为玻璃器皿 优点：消毒后的器皿干燥、易于存储 缺点：热传导慢 方式：1.加热到160 ℃以上，保持90~120min 2.灼烧 ABioCell 第二章 细胞培养 体外培养（In Vitro） 细胞培养（Cell Culture ） 组织培养（Tissue Culture） 器官培养（Organ Culture ） 细胞培养与组织培养 定义:从动物体内取出组织或细胞，模拟机体 内生理条件，在体外建立无菌、适温和 一定营养条件等，使之生长和生存，并 维持其结构和功能的技术。 优点：离体条件下观察细胞生命活动规律， 不受体内环境影响可人为改变条件， 进一步观察生理功能的改变。 2.1细胞培养的设施和基本条件 2.1.1实验室设计 原则 —— 防止微生物污染和有害因素影响 要求 ——工作环境清洁、空气清新、干燥 和无烟尘 清洗和灭菌室 无菌操作室(更衣间、缓冲间、操作间） 培养与观察室 制备室（液体制备） 储藏室（冰箱、液氮罐、储物柜等） 2.1.2常用仪器与设备 超净工作台 CO2培养箱 倒置显微镜 正置显微镜 解剖镜 过滤除菌装置 超声波清洗器 水纯化系统 pH计 天平 灭菌锅 干燥箱 冰箱 细胞计数板 离心机 移液器 显微操作仪 细胞融合仪 超声波细胞破碎仪 酶标仪 荧光素酶检测仪 细胞冷冻存储器 超净工作台 细 胞 培 养 箱 倒置显微镜 正置显微镜 解 剖 镜 滤 器 滤 膜 超声波清洗器 水 纯 化 系 统 pH 计 电 子 天 平 灭 菌 锅 电 热 干 燥 箱 超 低 温 冰 箱 细 胞 计 数 板 移液器 显 微 操 作 仪 电穿孔仪 酶 标 仪 ABioCell