酶促反应激工活与抑制机理.pptVIP

酶促反应激活与抑制机理 C:王鑫瑞 Support:DDB,XX，刘治愈 酶促反应的特点？ 高效 特异性 可调节性 高效 特异性（绝对，相对，立体） 可调节性（抑制，激活，变构） 酶简介 活性中心 酶分子中直接与底物结合，并和酶催化作用直接有关的区域叫酶的活性中心（active center）或活性部位（active site) 酶促反应 是如何进行的呢？ 酶促反应 中间产物假说： 诱导契合假说：底物首先与酶弱结合，然后酶改变其构象，增加了与过渡态的亲和力并稳定这个过渡态，因此减少了达到过渡态所需的活化能。（酶与底物互变） 酶与底物靠近形成酶-底物复合物（诱导契合假说），通过邻近效应与定向排列、多元效应、表面效应的影响，从而大大降低反应活化能。 酶促反应的抑制 不可逆抑制 抑制剂与酶的活性中心的必须基团紧密结合（共价键），使酶失活。 不可逆抑制 不可逆抑制 发生不可逆抑制时抑制剂与酶的活性中心紧密结合，不能用透析、超滤等方法予以除去。解除抑制的方法主要是使用与抑制剂结合更为紧密的物质将酶置换。 可逆抑制 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 竞争性抑制 竞争抑制的原理是抑制剂与底物结构相似，与底物竞争，阻碍酶-底物复合体的形成。 竞争性抑制 非竞争性抑制作用 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合,底物与抑制剂之间无竞争关系,但酶-底物-抑制剂复合物（ESI）不能进一步释放出产物。 非竞争性抑制 反竞争性抑制 抑制剂仅与酶和底物形成的ES结合，使ES的量下降。既减少从ES转化为产物的量，也同时减少从ES解离出E和S的量。 反竞争性抑制 酶的激活 激活剂：使酶从无活性转变为有活性或活性增加的物质。 一般认为激活的机理是激活剂通过配位，切割，成键等作用改变酶的结构，使酶具有催化反应所需的结构。 酶（原）激活的例子 来点儿公式 酶促反应速率公式是使用与反应初期的速率计算公式。其双倒数形式在验证抑制机理时十分有用。 酶促反应速率方程 有抑制作用存在时的速率方程 以非竞争性抑制作用为例： 基本的套路是不变的。。。 需要修改一下酶守恒的表达式。 Thank You E+S ES + I EI + I +S ESI * 酶蛋白 + 辅助因子 全酶 无催化活性 无催化活性 有催化活性 holoenzyme 决定反应的性 质和反应类型 决定反应的特异性 辅助因子 金属离子 小分子有机化合物 组成 或 分类 辅基 (prosthetic group) 辅酶 (coenzyme) 活性中心内的必需基团 结合基团 与底物相结合 催化基团 催化底物转变成产物 位于活性中心以外，维持酶活性中心应有的空间构象所必需。 活性中心外的必需基团 抑制 竞争性抑制 不可逆抑制 可逆抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 例1 羟基酶的失活 例2 巯基酶的失活 E+S ES E+P + I EI E+S ES E+P + I EI + I +S ESI E+S ES + I ESI E+P 酶原 一定条件 某些肽键断裂 结构改变 形成或暴露出活性中心 赖 缬 天 天 天 天 甘 异 赖 缬 天 天 天 天 缬 组 丝 S S S S 46 183 甘 异 缬 组 丝 S S S S 肠激酶 胰蛋白酶 活性中心 胰蛋白酶原的激活过程 k1 平衡近似 用酶总量守恒式对[ES]进行替换。 合并同类项 我们认为酶促反应速率最大的时刻是酶被饱和的时刻。达到最大速率时[ES]=[Et] *