脑缺血再灌_注后神经元凋亡及缺血预适应的机制探讨.docVIP

缺血预适应抗脑缺血再灌注后神经元凋亡的机制 ( 文献综述 ) 专业：生理学 姓名：董印 （9917028） 班级：99级临床医学七年制专业 导 师：陈连璧教授（山东大学医学院生理学研究所） 2004年6月16日 缺血预适应抗脑缺血再灌注后神经元凋亡的机制 ( 文献综述 ) 缺血性脑中风是目前严重威胁人类健康的疾病之一，其发病率及致死率均非常高。尽管近十几年来对脑缺血机制进行了大量研究，但因其机制极为复杂，缺乏有效的干预手段，故预后极差。动物实验研究发现，脑缺血后及时地恢复血流灌注可以逆转缺血半影区的神经元死亡，但在某些易损区却可以诱发迟发性神经元凋亡。脑缺血再灌注后神经元凋亡，是一个复杂的过程，阻止凋亡的发展，将为脑血管病的治疗提供更为准确的理论支持。近年来研究证明，短暂的非致死性缺血及随后的氧化应激启动细胞内信号转导通路，可通过调节靶蛋白活性，特别是促进转录因子如HIF-1、AP-1、NF-ΚB、P53等的表达或提高其转录活性，从而合成多种对细胞有保护作用的应激蛋白质，保护细胞免受损伤或修复已有损伤，即所谓缺血预适应（ischemic preconditioning，IPC）。本文对缺血预适应抗凋亡的机制作以综述，以期对探讨脑缺血再灌注后神经元凋亡的干预措施有所帮助。 １. 脑缺血再灌注导致神经元凋亡 1.1 脑缺血再灌注损伤 缺血再灌注损伤是指组织器官缺血一定时间重新得到血液灌注，其功能不仅未能恢复，结构损伤和功能障碍反而加重近10年来，人们对脑缺血再灌注损伤进行了广泛、深入研究，提出“缺血损伤瀑布”的概念Kerr等人在1972年提出的，它是一种由基因控制的细胞自主性死亡过程，在生理情况下也称“程序性细胞死亡”，是维持内环境稳定的机制之一[1]。近年来发现细胞凋亡与某些病理状况有关，过度抑制或过度增强均可导致疾病的产生。越来越多的证据表明，神经元凋亡是脑缺血再灌注后迟发性神经元死亡的基本形式，但在耐受细胞中同时发现一种平行的主动神经元存活过程，这两种相反的级联过程均由基因调控[2]。有关的基因介绍如下。 1.2 凋亡相关基因 1.2.1 bcl-2家族 Bcl-2是相对分子量为25KD的整和膜蛋白，分布于线粒体、内质网和细胞核膜上。其羧基端含疏水序列，与其分布于线粒体膜有关，而其氨基端主要分布于细胞质内。最近研究显示bcl-2家族在脑缺血动物模型梗死灶边缘表达增高，不同成员在凋亡过程中对线粒体作用不同，其中bcl-2、bcl-xl、bcl-w、mcl-1等对线粒体有保护作用，{}[][][]1而bax、bad、bak、bik、bid、bim、bok及bcl-x等则有促凋亡作用，细胞凋亡与否，取决于这两种蛋白的比值[4，5，6]。该族蛋白的功能通常以二聚体的形式所决定，当以Bcl-2同源二聚体存在时，发挥抑制细胞凋亡的功能，而当Bcl-2与Bax或Bid等形成异源二聚体时，抑制凋亡作用丧失，从而促进凋亡的发生。 1.2.2 p53 野生型p53基因具有诱导细胞凋亡的功能[7]，但该基因突变后可抑制凋亡。野生型p53基因编码的P53蛋白是一种DNA结合蛋白，在细胞周期的G1期发挥检查点的功能，负责检查染色体DNA是否损伤。如有发现有缺陷的DNA，就可刺激CIP(细胞周期蛋白依赖激酶CDK-interacting protein-1)的表达，阻止细胞进入细胞周期，并启动DNA修复机制。一旦修复失败，P53则启动细胞凋亡机制。研究发现P53介导凋亡的机制不需要P21的参与，主要是通过上调bcl-2家族的促凋亡成员bax及下调抗凋亡成员bcl-2和bcl-xL。Bax促进cytC的释放，通过与Caspase-9结合而激活死亡执行者Caspase-3，导致细胞凋亡。 1.2.3 Caspase Caspase家族蛋白酶是半胱氨酸蛋白酶，能在Asp之后切割蛋白，迄今已发现十余种Caspase。脑缺血后，氧化应激、持续性去极化均损伤线粒体通透转换孔（MPT），使线粒体通透性破坏，导致Cyt C及凋亡诱导因子AIF释放，从而启动调往信号途径。Cyt C从线粒体释放到细胞浆后与凋亡蛋白酶激活因子Apaf- 1结合，激活Caspase-9，Caspase-9切割后激活Caspase-3，后者被认为是凋亡的最终执行蛋白。AIF从线粒体释放到细胞浆后进入核内，失去其线立体定位序列结构域，表达凋亡效应。实验表明，Bax可从细胞浆转移到线粒体，增加线粒体膜的通透性，释放Cyt C入细胞浆，激活Caspase-3[13]。 1.2.4 fas/apo-1 Fas是一种细胞表面受体，它伸向细胞浆的部分有一段与TNF－α受体相似，与TNF－α和NGF）受体高度同源。FasL蛋白与Fas分子结合，通过信号转导，最终诱发凋亡[8]。