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ElISA原理讲解

ELISA的原理和类型   ELISA原理 ELISA-测抗原(Ag)或抗体(Ab) 三要素: 抗原或抗体的固相化 抗原或抗体的酶标记 底物被酶催化成为有色产物—定性和定量– 放大免疫反应的信号 抗体分子的结构示意图 抗原抗体反应 双抗原(体)夹心法测抗体 双抗体夹心法流程 双抗体夹心法测抗原 Hook effect 病毒的血清型 类风湿因子(RF)的干扰 能和多种动物IgG的Fc段结合。它可充当抗原成份,同时与固相抗体和酶标抗体结合,表现出假阳性反应。 双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心 间接法测抗体 竞争法测抗体 捕获包被法测抗体 底物系统 * * * * S +H2O2 s E* 轻链 重链 卵白溶菌酶与抗体结合的3D示意图 Ab恒定,Ag递增 沉淀形成量 Ab过量前带 Ag过量后带 等价带 包被抗原 * 酶标抗原 待测抗体 包被抗体 * 酶标抗体 待测抗原 Anti-HIV, Anti-HBs 双抗体夹心法 双抗原夹心法 HBsAg ,HCV core Ag, HBeAg,HBV preS1,PreS2 酶标抗体 样品 底物 单抗 终止液 酶标仪测定OD值 * 包被抗原 待测抗体 * 酶标抗体 Anti-HCV, Anti-HEV 包被抗原 待测抗体 * 酶标抗体 Anti-HBc 包被抗体 待测抗体 特异性抗原 * 酶标抗体 Anti-HBc IgM *

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