T-2毒素的代谢及其代谢物的定量讲解.pptVIP

T-2毒素的代谢及其代谢物的定量 2011-1-16 摘 要 T-2毒素的代谢产物 T-2毒素在大鼠肠道内的表现 T-2毒素定量 实验设想 T-2毒素的代谢产物 HT-2毒素 T-2四醇 T-2四醇四醋酸 3’-OHHT-2毒素 3’-OHT-2毒素 T-2三醇 T-2毒素 T-2毒素的代谢产物 T-2毒素 HT-2毒素 T-2四醇 酯酶 T-2毒素 3’-OHHT-2毒素 3’-OHT-2四醇 微粒体酶 几种 羟基化 衍生物 T-2毒素在大鼠肠道内的表现 T-2毒素在大鼠肠道内的表现 血管灌流 T-2毒素半衰期46.9min HT-2毒素半衰期12.9min 十二脂肠注射 T-2毒素半衰期33.0min HT-2毒素半衰期25.6min T-2毒素在大鼠肠道内的表现 HT-2毒素 3’-OHHT-2毒素 葡萄糖醛酸苷 结合物 T-2毒素在大鼠肠道内的表现 肝脏是T-2毒素体内代谢转化的重要器官 肠道也是代谢消除T-2毒素的主要器官——46%小肠代谢 T-2毒素的代谢转化不是解毒作用，而是小肠又可成为攻击的器官。 T-2毒素在大鼠肠道内的表现 经十二脂肠注射进入肠腔的T-2毒素仅有12%未经小肠首过代谢而以原型的形式吸收入灌流液 表明：毒素经肠腔染毒后的代谢转化速度很高。 毒素进入肠腔后可受到肠腔内丰富的 和 的双重作用。 微生物代谢酶 肠壁组织中代谢酶 T-2毒素在大鼠肠道内的表现 具体表现： 粘膜出血 上皮细胞坏死 肠壁通透性增加 肠腔积液严重 T-2毒素定量 测定T-2毒素代谢物的方法： 酶联免疫吸附测定法（ELISA） 气相色谱法 T-2毒素定量 ELISA法具有方法简单、快速、灵敏等特点，具有广阔的发展前景。但是ELISA测定法所需的抗体不容易制备，限制了它的应用价值。 气相色谱法的缺点是柱效低，而且需要对样品进行衍生。 T-2毒素定量 利用毛细管电泳仪，建立一种高效、快速，并且简单的分离方法。 12min内成功地分离定量了7种T-2毒素代谢物。 T-2毒素定量 胶束电动毛细管色谱（MEKC或MECC） 当操作缓冲液中加入大于其临界胶束浓度的离子型表面活性剂时表面活性剂就聚集形成胶束，其亲水端朝外憎水非极性核朝内，溶质则在水和胶束两相间分配，各溶质因分配系数存在差别而被分离。对于常用的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，进样后极强亲水性组分不能进入胶束，随操作缓冲液流过检测器（容量因子k′= 0）；极强憎水性组分则进入胶束的核中不再回到水相，最后到达检测器（k′＝∞）。 T-2毒素定量 胶束电动毛细管色谱特点： 离子型化合物和中性化合物可同时分离 T-2毒素定量 分离原理 胶束： 表面活性剂在水中浓度达到临界胶束浓度时，可形成胶束 实验设想 关于快速检测HT-2毒素和T-2毒素的方法设想 利用传感芯片进行表面等离子体筛选 实验设想 传感芯片：能感受规定的被测量并按照一定的规律转换成可用信号的器件或装置，通常由敏感元件和转换元件组成 。 表面等离子体（SPS）是指在金属表面存在的自由振动的电子与光子相互作用产生的沿着金属表面传播的电子疏密波。 实验设想 其产生的物理原理如下：如图所示，在两种半无限大、各向同性介质构成的界面，介质的介电常数是正的实数，金属的介电常数是实部为负的复数。根据maxwell方程，结合边界条件和材料的特性，可以计算得出表面等离子体的场分布和色散特性。 实验设想 一、将HT-2衍生物和单克隆抗体覆盖在 传感芯片上，检测样品中的T-2毒素 和HT-2毒素的存在。 利用胶束电动毛细管色谱法测样品 中含量。 实验设想 二、虾生存能力非常强，江、河、湖泊、稻田、池塘，甚至一般鱼类不能生存的小沟渠也有它的存在，就算在污染的水源里龙虾照样能存活。正因为这种习性，虾的体内极易积蓄很多有害物质，如果吃了这种龙虾就容易引起人体疾病。 因此让毒素在虾体内富集，然后定期测定其中含量，得以发现虾对T-2毒素的代谢规律。 实验设想 以上数据和想法均来自参考文献 具体方法有待进一步学习和探讨