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选修三 现代生物科技专题 目录 选修三 现代生物科技专题 1 专题一 基因工程 2 1.1 DNA重组技术的基本工具 2 1.2 基因工程的基本操作程序 3 1.3 基因工程的应用 6 1.4 蛋白质工程的崛起 7 专题二 细胞工程 7 2.1 植物细胞工程 7 2.2动物细胞工程 9 专题三 胚胎工程 12 3.1 体内受精和早期胚胎发育 13 3.2体外受精和早期胚胎培养 14 3.3胚胎工程的应用及前景 15  专题一 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫DNA重组技术。 “手术刀”——限制性核酸内切酶 切割DNA的工具是限制性核酸内切酶，简称限制酶 来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的 种类：约4000种 作用：①识别双链DNA中特定的核苷酸序列 ② 使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（切割特定位点） 实例：EcoR I Sma I 切割结果：产生粘性末端或平末端 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是粘性末端；当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端。 同一种酶一定产生同样的粘性末端，不同酶也可以产生相同的粘性末端。 补充问题 被切割的序列的特点：回文序列 为什么从原核生物中提取？ 为防止外源DNA入侵，将外源DNA切掉，相当于真核生物的免疫系统。 为什么不会切到自己的DNA？ ①没有这种序列 ②有保护方式，如甲基化酶，使被识别序列带上甲基。 “缝合针”——DNA连接酶 （一） 类型 来源 功能 相同点 不同点 E·coli DNA连接酶 大肠杆菌 都是将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 只能将双链DNA互补的粘性末端连接起来，不能连接平末端 T4DNA连接酶 T4噬菌体 既可以“缝合”粘性末端，也可以连接平末端 DNA连接酶只能连接双链DNA，不能连接单链。 因为E·coli DNA连接酶只能连接粘性末端，不能连接平末端，T4DNA连接酶连接平末端的效率比较低，所以在基因工程中，粘性末端的使用频率高于平末端。 DNA连接酶与DNA聚合酶的异同 比较项目 酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 相同点 作用本质 使相邻的两个核苷酸之间形成磷酸二酯键 化学本质 蛋白质 不同点 模板 不需要 需要 作用对象 DNA片段 脱氧核苷酸 作用结果 使两个DNA片段拼接为一个DNA片段 使脱氧核苷酸连接形成DNA片段 用途 基因工程 DNA复制 “分子运输车”——基因进入受体细胞的载体 作运载体的条件： 有一个至多个限制酶切割位点 在细胞进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA复制 有特殊的标记基因如四环素抗性基因，氨苄青霉素抗性基因 安全无毒 大小合适，易于操作 1.2 基因工程的基本操作程序 ①目的基因的获取②基因表达载体的构建③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测与鉴定 目的基因的获取 目的基因的种类： ①编码蛋白质的基因 ②具有调控作用的因子 获取的方法 用人工方法合成 从自然界已有的物种中分离出来 从基因文库中获取基因 ①基因文库 定义：将某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的菌群中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，成为基因文库。 I 基因组文库：基因文库中包含一种生物的所有基因，成为基因组文库 II部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因，成为部分基因文库。 ②cDNA 文库 定义：如果某种生物发育某个时期的mRNA反转录产生了多种DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，那么这个受体菌群就叫做这种生物的cDNA文库。 真核细胞 原核细胞 cDNA文库与基因组文库比较 文库类型 cDNA文库 基因组文库 文库大小 小 大 基因中启动子[具有启动作用的DNA片段，在非编码区] 无 有 基因中内含子[位于编码蛋白质序列的非编码段] 无 有 基因多少 某种生物部分基因 某种生物全部基因 物种间基因交流 可以 部分基因可以 利用PCR技术扩增目的基因 ①定义：PCR是多聚酶链式反应的缩写，PCR是一项在体外复制特定DNA片段的核酸合成技术 ②原理：DNA双链复制原理 ③前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列 ④条件：模板，四种游离的脱氧核苷酸，DNA聚合酶，能量，引物，合适的温度 ⑤过程：高温变性，低温复性，中温延伸 基因表达载体的构建 基因表达载体的构建是实施基因工程