第二章酶上师大生物技术解决方案.ppt

在一定条件下，每一种酶在某一定温度，其活力最大，这个温度称为酶的最适温度（ optimum temperature ） 。 通常动物体内酶的最适温度在37℃-50℃。 植物体内酶的最适温度在50℃-60℃。 酶的最适温度不是一个固定不变的常数。 酶活性 反应温度 温度对淀粉酶活性的影响 激活剂：凡是能够提高酶活力的物质都称为激活剂。 例如经透析过的唾液淀粉酶活力不高，若加入少量NaCl，则酶的活力大大增加，因此NaCl（更准确地说是Cl-）就是唾液淀粉酶的激活剂。 许多酶的激活剂是一些金属离子或其他无机离子。 例如，RNA酶需要Mg2+、脱羧酶需要Mg2+、Mn2+及Co2+等。 抑制剂：凡使酶的必需基团或酶活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶活力甚至使酶完全丧失活性的物质，称为抑制剂（I）。其作用称为抑制作用。 抑制作用一般分为不可逆抑制作用和可逆抑制作用。 1．不可逆抑制作用：抑制剂以共价键与酶活性中心的必需基团结合，抑制了酶的活性并且不能用透析或超滤等物理方法使抑制剂与酶分子分开，此种抑制作用称为不可逆抑制作用。 例如，一些-OH酶的不可逆抑制作用： DFP（DIFP）对胰凝乳蛋白酶的抑制 解毒：二巯基丙醇（BAL） 2．可逆抑制作用：抑制剂与酶分子的结合是通过非共价键，两者结合比较疏松，用透析等物理方法可以解除抑制这种抑制作用称为可逆抑制作用。 可逆抑制作用又可分为 竞争性可逆抑制（Competitive reversible inhibition） 非竞争性可逆抑制（Non-competitive reversible inhibition） 反竞争性可逆抑制（Uncompetitive reversible inhibition） 三种主要的类型。 竞争性可逆抑制作用（Competitive reversible inhibition）：抑制剂的分子结构与底物的结构相似，与底物竞争性地与酶活性中心结合，使酶活性受抑制。 非竞争性可逆抑制（Non-competitive reversible inhibition）：抑制剂与酶活性中心以外的部位结合使酶反应可逆受到抑制。 Non-competitive inhibition 反竞争性抑制（Uncompetitive reversible inhibition）：抑制剂与酶-底物的复合物结合，使酶反应可逆受到抑制。 别构酶主要有以下几方面特点： 它们一般是寡聚酶。在酶分子上除了有和底物结合的活性部位以外，还有和底物以外的某种或某些物质特异结合的调节部位（别构部位），这两种部位或者在酶的不同亚基上或者在同一亚基的不同部位上。 具有别构效应。 当底物或底物以外的物质和别构酶分子上的相应部位非共价地结合后，通过酶分子构象的变化影响酶的催化活性，这种效应称为别构效应，引起别构效应的物质称为别构效应剂。凡是和酶分子结合后使酶反应速度加快的别构效应剂就称为别构激活剂（正效应剂）。反之，称为别构抑制剂（负效应剂）。正效应剂常常是别构酶的底物，负效应剂一般是代谢反应序列的终产物。 别构酶的反应初速度对底物浓度作图不服从Michaelis-Menten关系式，不呈直角双曲线。 许多别构酶的V对[S]作图常呈S形曲线，有些别构酶的V对[S]作图常呈比较平坦的曲线。它们这种动力学性质对酶反应速度的调节是很有利的。 1964年国际生化协会酶学委员会为了统一酶的单位建议：在一定条件下，1分钟内能转化1μmol（微摩尔）底物的酶量称为一个酶单位（U）. 1972年国际生化协会酶学委员会推荐了一个新单位“katal”(简称kat)以便和国际单位SI取得一致。一个“katal”单位是指在一定条件下1秒钟内转化1mol底物所需要的酶量。 kat和U的换算关系如下：1 kat=6×107 U 1 U=16.67 n kat 另外，在酶学研究和生产中还常用一种酶的活力单位称比活力（比活性），是指每单位质量样品中的酶活力，即每mg蛋白质中所含的U数或每kg蛋白质中含的kat数。 胰凝乳蛋白酶原 （无活性） 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 胰蛋白酶原 肠肽酶 胰蛋白酶 （有活性） 同工酶：指具有催化相同的化学反应，但酶蛋白的分子结构、理化性质、免疫学性质都不同的一组酶。 酶的组成、结构及性质： H3M LDH2 H2M2 LDH3 HM3 LDH4 M4 LDH5 H4 LDH1 为H亚基 为M亚基 催化的反应： 丙酮酸 + NADH + H+ 乳酸 + NAD+ LDH 组织分布和催化活性：在心肌中LDH1 和LDH2含量丰富，它们同乳酸的亲和力高。在骨骼和肝脏中LDH4 和LDH5的含量丰富，它们同丙酮酸的亲和力高。 乳酸脱氢酶