神经干动作电位-实验技术总结.pptVIP

生物信号的采集及MD2000的使用 生物电信号的采集 换能器 压力换能器 张力换能器 刺激器 刺激方式：单次，连续，定时，串刺激 刺激参数：刺激强度，波宽，频率 神经干动作电位的引导、传导速度测定和不应期的观察 动作电位的记录方法 实验目的 实验原理 用电刺激神经，在刺激电极的负极下神经纤维膜内产生去极化，当去极化达到阈电位，膜上产生一次可传导的快速电位反转，即动作电位 神经干由许多神经纤维组成。其动作电位是以膜外记录方式记录到的复合动作电位 如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波先后通过两个电极处，便引导出两个方向相反的电位波形，称双相动作电位 方法和步骤 观察项目 动作电位传导速度的测定Measurement of Conduction Velocity of AP 注意事项 抓取蟾蜍时，禁忌挤压两侧耳部的毒腺，禁止将蟾蜍头部对着自己及他人，以免其眼后线处分泌毒液射入眼中。 剥皮后须将手及用过的器械洗净，再进行下一步操作 用玻璃分针去除神经周围的结缔组织，避免用力牵拉神经或用金属器械夹捏神经，以防神经损伤。 标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟，使神经兴奋性稳定。实验过程中也需经常用任氏液湿润标本，以防影响标本的机能。 注意事项 神经干要有足够的长度，制成后须放在任氏液（Ringer’s solution)中浸泡数分钟，用锌铜弓检测标本的活性 一定要将神经干粗端放于刺激电极一侧 (why?) 标本应平直地放在电极上与电极密切接触，保持湿润，但要用滤纸吸去屏蔽盒中过多的任氏液，以防短路 结果与讨论 传导速度 传导速度应为最快的Aα类神经纤维的传导速度，约30-40m/s，普通实验条件下测得应为15－30m/s之间 绝对不应期的时程 约相当于峰电位的时程，数ms不等 思考与探讨 实验中所得动作电位是否符合“全或无(all or none)”的性质？为什么？ 两个记录电极之间的神经损伤后，动作电位有何变化？为什么？ 当两个刺激脉冲的时间间隔逐渐缩短时，第二个动作电位如何变化？为什么？ 为何要将神经的中枢端放置在靠近刺激电极处？如果反放会有何结果？ * 生物体 生物信号 放大器 A/D 微机 刺激器 程控 换能器 程控 细胞内记录 （单向动作电位） 细胞外记录 （双向动作电位） 基础知识 掌握离体神经干动作电位的细胞外记录法及其基本波形的判断和测量。 掌握神经干动作电位传导速度及其不应期的测定方法。 观察机械损伤对神经兴奋和传导的影响 双相动作电位 兴奋区 细胞外引导电极 检流计 制备坐骨神经干标本  1.破坏脑和脊髓 2.剪除躯干上部及内脏 3.剥去皮肤（手及用过的器械用自来水冲洗） 4.分离两腿 5.制坐骨神经干标本 连接实验装置 引导神经干双相动作电位 观察刺激强度对动作电位幅度的影响 找出阈强度和最大刺激强度 测量动作电位传导速度： v =s/t 观察单相动作电位和不应期 测定不应期条件：双刺激（串数2）；间隔↓ － + S Δt ?传导速度测定??υ=? SAC Δt 刺激器 输入通道 R1- Rr1+ R2- R2+ 双相动作电位图 *