《生物化学》实验教学指导.docVIP

《生物化学》实验教学大纲 课程编号： 课程名称：（生物化学/Biochemistry） 课程总学时：72 实验总学时：18 实验课性质：（独立设课） 适用专业：五年制中医、针灸推拿专业 承担实验室（或教研室）：基础医学院生物化学教研室 基础医学院西医综合实验室 一、课程实验教学简介 生物化学实验教学作为医学、药学、生物学及相关学科的必设环节,它应用化学的方法和手段来研究生物有机体的物质组成及变化。其作用是使学生在生化实验技术、仪器的使用、分析和解决问题能力等方面有所提高；同时使学生掌握一般生物化学实验中的实验原理和操作方法；在实验过程中可使学生的创新能力和综合素质得以提高，并结合理论课所学内容相应地安排实验课,力求实验内容与理论教学内容相协调。 二、课程实验教学的目的和基本要求 生物化学是一门实验性学科，其所有知识均来自于实验。本课程着眼于学生学习和掌握生物化学课程的基本理论、基本知识以及实验技能，培养学生具有初步分析问题和解决问题的能力。 生物化学实验教学以学生在实验室实践为主,发挥学生的主体作用，教师只作必要的实验原理和注意事项的讲解,并注意引导学生拓展所学的内容，通过实验内容的学习了解生物化学技术的原理和操作要点，提高学生的实践能力和创新能力。 三、学生应掌握的实验技术和基本技能 1．熟练掌握以下各项生物化学实验的基本操作技能： 各种常用玻璃仪器的洗涤和使用： 滴管、吸量管、微量加样器的使用。 离心机、分光光度计、紫外检测仪、pH值试纸、层析系统、凝胶成像系统、摇床、水浴箱、电泳仪系统等的使用。 各种试剂的配制： 2．掌握以下各项生化实验基本技术和基本原理 蛋白质的颜色反应、比色分析法和紫外分光光度法测定蛋白质的含量。 醋纤膜电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血浆脂蛋白 血液葡萄糖的测定方法。 酶的性质以及酶促反应动力学有关方法（底物浓度、PH对反应速度的影响）。 质粒DNA的抽提与鉴定的方法。 3．熟悉生物化学实验技术的有关理论 分光光度法及比色分析法基本原理。 离心理论。 层析技术理论。 电泳技术理论。 核酸杂交、基因重组等部分分子生物学实验技术理论。 生物大分子分离、纯化的一般实验设计相关理论 。 实验误差、数据处理、有效数字相关理论。 精密度、标准差、变异系数、回收率概念及理论。 四、实验项目名称、性质和学时分配 序号 实验项目名称 实验性质 学时数 必做/选做 01 酶的性质 验证性、应用性 3 必做 02 血糖测定（福林一吴法） 验证性、应用性 3 必做 03 血清总胆固醇的测定（硫磷铁法） 验证性、应用性 3 必做 04 转氨基作用（纸层析法） 验证性、应用性、综合性 3 必做 05 酵母RNA的提取和鉴定 验证性、应用性 3 选一 06 胍——酚法提取纯化重组大肠杆菌核酸及琼脂糖凝胶电泳鉴定、紫外分光光度法鉴定及定量 验证性、应用性、综合性 3 07 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 验证性、应用性 3 必做 注：实验性质是指验证性、应用性、设计性、综合性、创新性实验等。 五、各单项实验的具体内容和要求(包括实验分组人数要求)： (一) 实验名称：酶的性质 实验内容： 1、酶的专一性 2、PH对酶促反应速度的影响 3、温度对酶促反应速度的影响 4、激活剂对酶促反应速度的影响 5、酶的竞争性抑制 实验目的要求： 1、掌握通过实验现象了解酶的性质的定性实验技能 2、通过蔗糖酶和唾液淀粉酶的催化反应特点熟悉酶作用专一性原理 3、通过pH和激动剂对唾液淀粉酶活性的影响加深理解酶促反应动力学理论 4、通过丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制加深理解酶的竞争性抑制作用理论 (二)实验名称：血糖测定（福林一吴法） 实验内容： 1、制备无蛋白血滤液 2、测血糖 3、计算结果 实验目的要求： 掌握血糖测定（福林一吴法）的方法。 熟悉分光光度计的原理和基本操作方法 了解其他几种血糖测定方法的原理 通过血糖测定实验了解临床检测糖代谢是否正常的方法 (三)实验名称：血清总胆固醇的测定（硫磷铁法） 实验内容： 1．制备胆固醇的乙醇抽提液 2．比色法测定胆固醇标准应用液和乙醇抽提液的吸光度。三支，编号。 3．结果计算 实验目的要求： 掌握血清总胆固醇的测定（硫磷铁法）的方法。 进一步熟悉分光光度计操作方法。 熟悉离心技术原理和操作方法。 4、通过血清总胆固醇的测定实验了解临床检测血清总胆固醇的意义。 (四)实验名称：转氨基作用（纸层析法） 实验内容： 1、大白兔肌匀浆的制备（由实验室准备室制备） 2、转氨基反应 3、氨基酸的纸层析分析 实验目的要求： 1、掌握纸层析法分离分析氨基酸的方法 2、通过实验熟悉转氨基作用的生化理论知识 3、通过实验了解层析技术的原理和应用 (五)实验名称：酵母RNA