电泳和色谱分.离技术(应用).pptVIP

第6章蒸发 概述——过程特点 概述——过程特点 概述——过程特点 各种不同分子量的蛋白质在电场内迁移速率与它的净电荷数成正比，而与其分子半径及溶液黏度成反比。 实验证明，蛋白质的电泳迁移速率与蛋白质分子量的对数成线性关系 电泳技术分类 影响电泳迁移率的因素 ①电场强度。电场强度是指单位长度(cm)的电位降．也称电势梯度。根据电场强度不同，将电泳分为常压电泳(2-10V/cm)和高压电泳(20-200V/cm)。电场强度高，带电质点的迁移率加速，因此省时，但会产生大量热量。 ②溶液的pH值。溶液的pH值决定被分离物质的解离程度和质点的带电性质及所带净电荷量。 对于带有两性基团的电解质，溶液存在一pH值，此时，溶液所带正负电荷相等，即分子的净电荷等于零，此时，在电场中不再移动，这一pH值称为电解质的等电点（isoelectric point, PI)。 若溶液pH值处于等电点酸侧，即pH＜p I，则蛋白质带正电荷，在电场中向负极移动； 若溶液pH值处于等电点碱侧，即pH＞pI，则蛋内质带负电荷,向正极移动。溶液的pH值离pI越远，质点所带净电荷越多，电泳迁移率越大。 ③溶液的离子强度 一方面，电泳液中的离子浓度增加时会引起质点迁移率的降低。 带电质点吸引相反电荷的离子聚集其周围，形成一个与运动质点电荷相反的离子氛(ionic atmosphere),离子氛不仅降