2011高三生物一轮复习精品课件：选修31.3、1.4基因工程应用蛋白质工程崛起.pptVIP

3.(2008年海南高考)右图 为某种质粒表达载体简图， 小箭头所指分别为限制性 内切酶EcoR Ⅰ、BamHⅠ 的酶切位点，ampR为青 霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。 据图回答： (1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有_________、________、________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行________。 (2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是__________。 (3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是______，其合成的产物是________。 (4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是____________________。 【解析】　 在基因表达载体的构建过程中用同种限制酶来切割目的基因和质粒，使之产生相同的黏性末端，以利于DNA