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第22章引起侵袭性感染的真菌要点

黑曲霉菌落 黑曲霉,光镜 X200 土曲霉菌落 土曲霉,光镜 X200 构巢曲霉菌落 构巢曲霉,光镜 X400 杂色曲霉菌落 杂色曲霉,光镜 X400 组织胞浆菌属 有两个种:荚膜组织胞浆菌、组织孢浆菌的杜波变种。 本菌传染性极大,主要侵犯网状内皮系统,有时也可由血行播散而侵犯全身各脏器。 组织胞浆菌是一种双相型真菌,在25℃培养时呈典型菌丝体,在37℃培养时为酵母型,位于细胞内或外。 微生物检验 1.直接显微镜检查 应涂片染色后检查。 痰液等标本:涂片后先用甲醇固定10min,再用姬 姆萨染色镜检 。 皮损、脓液等标本:用20%KOH涂片后镜检 2.抗原检测、药物敏感试验、抗体检测 3.分离培养与鉴定 ①标本 含抗生素的沙氏培养基 25℃培 养,生长缓慢,有时需4~6周才开始生长,逐渐 形成白色至棕色绒毛状菌落 。 ② 转种于血琼脂培养基上,37℃培养,很快形成酵母型菌落。 ③培养物显微镜特征 :25℃沙氏培养,可以发现特征性的大分生孢子,但初代培养不典型,继代培养可有典型大分生孢子。 ④鉴定:取可疑菌落涂片染色镜检,并作脲酶 试验和明胶液化试验。 荚膜组织胞浆菌菌落为棉絮状,镜检可见细长有隔菌丝,菌丝侧面或孢子柄上长有特殊的圆形大分生孢子,厚壁,四周有棘突,排列如齿轮直径8~14μm,表面有指状突起,形成对组织胞浆菌有突出诊断意义的特征性齿轮状大分生孢子。血液标本油镜下镜检可见在中性粒细胞或单核细胞中有卵圆形或圆形的酵母细胞。 卡氏肺孢菌 卡氏肺孢菌(pneumocycsis carinii,PC),曾称为卡氏肺孢子虫。 卡氏肺孢菌可寄生于多种动物,也可寄生于健康人体。广泛分布于自然界,如土壤和水等。卡氏肺孢菌病的传播途径主要是空气传播,在健康人体内,多为无症状的隐性感染。当宿主免疫力下降,如长期使用免疫抑制剂、器官移植、肿瘤、艾滋病等,潜伏的卡氏肺孢菌在病人肺内大量繁殖扩散,使肺泡上皮细胞受损,导致间质性浆细胞肺炎,又称卡氏肺孢菌性肺炎(PCP)。 卡氏肺孢菌微生物检验 直接显微镜检查  从患者痰液、支气管肺泡灌洗液或肺活检组织中检查PC是确诊本病的重要依据。常用的染色方法有吉姆萨染色、果氏环六亚甲基四胺银染色(GMS)和亚甲胺蓝染色。可以检出包囊和滋养体两种形态。 抗原检测,核酸检测,抗体检测等。 卡氏包囊 卡氏包囊和滋养体 毛霉目真菌 毛霉目真菌属于接合菌门、接合菌纲,有7个科,主要是毛霉科 。 本病是一种发病急,进展快、病死率极高的系统性条件致病性真菌感染。 毛霉目真菌有无隔菌丝,在一些陈旧培养基中偶见有隔菌丝 。 毛霉目真菌微生物检验 直接镜检 临床标本 + 20%KOH 湿片,直接镜检可见折光性强的粗大菌丝,偶见孢子囊及孢子囊梗。 分离培养 临床标本接种于不含放线菌酮的麦芽糖培养基、马铃薯培养基及沙氏琼脂培养基,25℃或37℃培养。 药物敏感试验,抗体检测。 鉴定 根据毛霉、根霉与梨头霉的形态特点。 毛霉 根霉 梨头霉 马尼尔菲青霉 双相性,在自然界中以菌丝形式存在,在 组织中则可形成小圆形到椭圆形细胞。 马尼尔菲青霉可引起马尼尔菲青霉病,引起广泛性播散性感染,主要侵犯人的网状内皮系统。 马尼尔菲青霉微生物检验 标本直接检验 :取骨髓涂片、皮肤印片或淋巴结活体组织瑞氏染色后镜检,可见到典型圆形或卵圆形有明显横隔的细胞,常在巨噬细胞内。 分离培养与鉴定:标本接种沙氏培养基上,在25℃培养为青霉相;37℃酵母相 。 抗原检测 鉴别要点:马尼尔菲青霉的孢子易与荚膜组织胞浆菌孢子相混淆,但前者孢子常有横隔,从不出芽。 马尼尔菲青霉 菌丝相 马尼尔菲青霉 酵母相 镰 刀 菌 镰刀菌生态适应性强,广泛分布于自然界土壤、植物的地上及地下部分或植物碎片,甚至可存在于沙漠及北极地区。 镰刀菌引起人类感染尤其是在免疫缺陷病人正逐年增多,其发病率和病死率仅次于白色假丝酵母菌和曲霉感染。 镰刀菌微生物检验 标本直接检验:可见分支、分隔的菌丝,与曲霉的镜下特征相似。 培养鉴定:常有培养基有燕麦培养基、马铃薯葡萄糖琼脂、石竹叶琼脂、合成琼脂、KCl培养基和土壤琼脂。PDA 和OA可用以观察菌落形态和色泽,产孢有时较少。KCl培养基可用以观察分生孢子链的形成。土壤培养基有利于快速形成厚壁孢子。 第22章 引起侵袭性感染的真菌 中南大学湘雅医院 刘文恩 概 论 引起侵袭性感染的真菌,又称深部感染真菌,是指能侵袭深部组织和内脏及全身的真菌,主要有假丝酵母菌、隐球菌、曲霉、毛霉、组织胞

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