北京化工大学仪器分析第六章 紫外可见应用幻灯片.pptVIP

有机化合物紫外-可见吸收光谱 有机化合物紫外-可见吸收光谱 有机化合物紫外-可见吸收光谱 有机化合物紫外-可见吸收光谱 溶剂对紫外吸收光谱的影响 化合物的定性分析 异构体的确定 成分分析 测定蛋白浓度 本章重点 P168习题15 （10 min) 习题15答案 双光束仪器 IO I 双光束仪器的特点和不足： 测量方便，不需要更换吸收池 补偿了仪器不稳定性的影响 实现了快速自动吸收光谱扫描 不能消除试液的背景成分吸收干扰 双波长仪器 切 光 器 ?1 ?2 采用双单色器 ?/nm A 0 200 300 400 待测成分 干扰成分 ?1 ?2 选择等吸收的两个波长 消除光谱重叠干扰 A?1 = Aa ?1 + Ai ?1 A?2 = Aa ?2 + Ai ?2 Ai ?1 = Ai ?2 ?A = A?1- A?2(从图中可知) = Aa ?2 - Aa ?1 =（?a?1 -?a?2）bCa 消除了共存组分的干扰 双波长仪器能否消除背景干扰？ A?1 = lg I0/ I1 = ? ?1bC + Ab A?2 = lg I0/ I2 = ? ?2bC + Ab 式中 Ab 为背景吸收或干扰物质的吸收 若波长选择合适， ?1和 ?2处 Ab相同 则 ?A = lg I1/ I2 =（? ?1 -? ?2）bC 因此测量两波长 吸光度之差，就 消除了背景吸收 的干扰。 ?/nm A 0 200 300 400 ?1 ?2 ?3 多组分混合物中各组分分别测定 ——多波长分光光度法 A1 = ?11C1 + ?12C2 + ?13C3 A2 = ?21C1 + ?22C2 + ?23C3 A3 = ?31C1 + ?32C2 + ?33C3 ?ij为在波长i测定组分j的摩尔吸光系数 Ai 为在波长i测得该体系的总吸光度 解上联立方程可求出待测物浓度C1、C2、C3 显色反应及显色条件的选择 显色反应 将待测组分转变成有色化合物的反应 显色剂 与待测组分形成有色化合物的试剂 五、无机分析应用 显色反应类型 络合反应 氧化还原反应 取代反应 缩合反应 选择要素 灵敏度高(?大) 选择性好(以金纳米为例) 有色生成物稳定 组成恒定(不同络合比颜色不同) 显色剂在测定波长处无明显吸收 有色化合物与显色剂颜色对比度大，要求△? 60nm。 显色条件的选择 1.显色剂用量 P160 2.反应体系的酸度 影响金属离子和显色剂的存在形式、络合物组成、稳定性及反应进行程度 显色条件的选择 3.显色时间 4.显色温度 5.溶剂 6.干扰的消除 选择适当的显色反应条件 加入掩蔽剂 分离干扰离子(萃取法、离子交换法、吸附法等） 吸光度测量条件的选择 1.选择适当的入射光波长 一般应该选择λmax为入射光波长。但如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长（P163 图7-17）。 2.控制适宜的吸光度（读数范围） Tmin＝36.8%, Amin＝0.434（吸光度测量误差最小） 最佳读数范围 T %=70 ％ ～10％ A = 0.15～1.0 3.选择合适的参比溶液 若仅待测组分与显色剂反应产物有吸收，其它试剂均无吸收，用纯溶剂（水)作参比溶液； 若显色剂或其它试剂略有吸收，试液本身无吸收，用“试剂空白”(不加试样溶液)作参比溶液； 若待测试液有吸收，而显色剂等无吸收，则可用“试样空白”(不加显色剂)作参比溶液。 定性分析 结构分析 标准谱图对照 经验规则计算 官能团鉴定 顺反异构体的确定 互变异构体的确定 P147~149 五、有机分析应用 利用紫外光谱可以推导有机化合物的分子骨架中是否含有共轭结构体系,如C=C－C=C、C=C－C=O、苯环等。利用紫外光谱鉴定有机化合物远不如利用红外光谱有效，因为很多化合物在紫外没有吸收或者只有微弱的吸收，并且紫外光谱一般比较简单，特征性不强。利用紫外光谱可以用来检验一些具有大的共轭体系或发色官能团的化合物，可以作为其他鉴定方法的补充。鉴定化合物主要是根据光谱图上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长λmax即摩尔吸光系数ε值，来进行鉴定。 鉴定的方法有两种： （1）与标准物、标准谱图对照：将样品和标准物以同一溶剂配制相同浓度溶液，并在同一条件下测定，比较光谱是否一致。 （2）吸收波长和摩尔吸光吸收：如果样品和标准物的吸收波长相同，摩尔吸光吸收也相同，可以认为样品和标准物是同一物质。 化合物的定性分析