【2017年整理】生物化学设计性实验.docVIP

红富士苹果和水晶梨中多糖含量和蛋白质含量对比 摘要：本文以红富士苹果和水晶梨为材料，测定了其果肉中多糖及蛋白质的含量。结果表明：富士苹果中多糖的含量大于水晶梨中的多糖含量。 关键词: 多糖 蛋白质 红富士 水晶梨 含量 价值 对比 引言：苹果和梨是我们生活中最常见也是最多糖是单糖缩合的多聚物。水果多糖作为天然植物多糖中的一类，虽然早就引起了人们的注意，但早期的研究主要是为了搞清其作为结构物质在水果质构方面的作用及在水果贮藏与加工过程中的变化与控制，以改善和保持水果及其加工制品的感官品质。近年来随着天然活性多糖研究的深入，对水果多糖的研究重点也逐步转向了以开发利用为目的的水果多糖的提取分离、结构、化学和生物活性及应用研究，已有人对红富士苹果果肉中多糖蛋白质进行过测定（刘杰超，焦中高 2009），但还没有人对三叶草体内多糖做过相关的研究，也未对其叶和茎中所含多糖进行过对比。本实验的目的在于学习测定植物多糖的原理与方法，蛋白质是细胞中最重要的含氮生物大分子之一，承担着各种生物功能。 实验材料和方法 1.1材料：红富士苹果和水晶梨 1.2方法 1.2.1多糖含量测定：采用苯酚-硫酸法。用以标准葡萄糖做标准曲线。由公式：多糖含量（%）=(C*10*D/W*1000)*0.9*100 式中： C-标准曲线上查得的多糖含量 D-样品稀释倍数 W-样品重量 0.9-为校正系数 10-为定容总体积. 标准曲线的绘制：以490nm测定OD值以糖含量为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。 表1标准曲线制作及其待测液的A490nm 管号 1 2 3 4 5 6 苹果 梨 标准葡萄糖/ml 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 多糖提取液 1.0 1.0 蒸馏水/ml 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 蒸馏水 1.0 1.0 6%苯酚/ml 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 6%苯酚 1.0 1.0 浓H2SO4/ml 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 浓H2SO4/ml 5.0 5.0 室温下反应20min,冷却后 490nm OD值 0 0.098 0.195 0.232 0.329 0.485 490nm OD值 0.611 0.318 图1标准葡萄糖含量吸光值曲线及其回归方程 1.2.2蛋白质含量的测定：采用考马斯亮蓝法(王林嵩 2007)溶液配制如表1一所示： 试剂 试管编号 0 1 2 3 4 5 苹果 梨 标准蛋白质溶液/ml 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 0.2 0.2 相当与蛋白质含量/ug 0.0 20 40 60 80 100 ？ ？ 双馏水/ml 0.1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.8 0.8 蛋白质试剂/ml 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 A595 0 0.177 0.318 0.435 0.520 0.535 0.107 0.077 图2蛋白质标准曲线及其回归方程 实验结果与分析 2.1结果 2.1.1富士苹果与水晶梨多糖含量对比如图3所示。 图3富士苹果与水晶梨多糖含量对比 分析：由图3可以得出在富士苹果中多糖含量大于水晶梨，富士苹果多糖含量是水晶梨多糖含量的1.61倍。若是单从营养方面考虑富士苹果所含多糖类物质多，则富士苹果优与水晶梨。 2.1.2富士苹果与水晶梨蛋白质含量对比如图4所示。 图4富士苹果与水晶梨蛋白质含量对比 分析：由图4可以得出富士苹果中蛋白质含量大于水晶梨，并且富士苹果中蛋白质的含量是水晶梨的1.38倍。则从营养方面讲富士苹果营养价值高于水晶梨。 讨论 本实验以生活中最常见的水果红富士苹果和水晶梨为材料，做了其果肉中多糖含量和蛋白质含量的对比。得出在等量的红富士苹果和水晶梨中多糖含量和蛋白质含量富士苹果中均高于水晶梨。据中国农业科学院郑州果树研究所研究表明，每100克苹果中含糖量在10%～15%之间，是低糖类水果，本实验所用的富士苹果中的多糖含量达22.1%，高于15%，其原因可能与气候有关，。苹果和梨都属于低蛋白质水果，曾经有人测过苹果中的蛋白质（许淑芳 朱江 考马斯亮兰G-250法测定苹果浓缩汁生产中的蛋白含量 2005），其结果表明蛋白质含量较低。据美国《读者文摘》报道苹果被列为健康水果之最。梨也是人们所受欢迎的水果也被列入健康水果之列。 苹果和梨中含有少量多糖。多糖是水果中一类重要的功能因子, 多糖的免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抑菌、抗病毒和降血糖等生物活性。近年来多糖类药物研究迅速发展，许多发达国家已经充分认识到多糖类药物具有广阔的前景并能带来巨