临床输血与检验__培训课件.ppt

标签和发血 配血单上，均需写上受血者姓名、床号、ABO及Rh血型、医院，献血者姓名、编号、 反复核对输血申请单和血液的标签，正确无误交叉配血试验结果的解释，发出血液内容的名称，日期和时间，以及工作人员的姓名， 输血前检查试验是一项具有高度科学性和责任性的工作，熟练和灵活应用血清学试验原理和技术，对所得试验结果能给予全面、细致观察和分析 最重要的是要有一颗救死扶伤，全心全意为伤病员服务的心 血型血清学常见的几项试验介绍 一．准备工作 （一）标本采集 1.抗凝血：ACD：血液＝1:4 5%Na2-EDTA：血液＝0.1:1 血清标本：37°C凝固――离心，或4°C过度分离血清以吸收自身冷抗体，若保存血清标本，可加10%NaN3至最后浓度为0.1% （二）红细胞悬液的配制 2常用红细胞悬液浓度 2%红细胞悬液：用于抗体效价滴定 5%红细胞悬液：用于血型鉴定或间接抗试验 10%红细胞悬液：用于测定抗体的亲合力 二．盐水介质凝集试验 应用范围：主要用于IgM抗体的检出、鉴定、配血、ABO、MN、P血型抗体可在盐水介质中凝集 原理：略 试验记录： 4+：一个大凝集块，背景透明，无游离红细胞 3+：数个大凝集块，背景透明，无游离红细胞 2+：许多小凝集块，肉眼可见，大小均匀，背景基本透明，有游离细胞 1+：很小凝块，肉眼还可见，背景不透明，游离细胞多，要用显微镜 w+(＋、－)：微小凝集块，肉眼很难看清，背景浑浊、显微镜观察 O（－）：无凝集，无溶血，全是游离细胞，要用显微镜观察 PH：部分溶血 H：完全溶血 缗钱状凝集的处理：加盐水稀释后观察 胶体介质凝集试验： 原理：胶体介质能使介质常数上升，降低红细胞zeta电势，缩补红细胞间距离――使IgG抗体致敏红细胞呈凝集 常见胶体介质：小牛血清白蛋白 人白蛋白 AB血清 受检者本人血清等 四．酶处理细胞的凝集试验 原理：某些蛋白水解酶能破坏红细胞表面丰富的唾液酸（带负电荷）降低zata电位，使细胞间距离缩短，IgG抗体与相关抗原红细胞产生凝集 特点：能显著增强Rh和kill系统的抗原抗体反应，但对M、N、S、s、Fga和Fgb抗原有破坏性 常用的酶有：菠萝酶、木瓜酶、无花酶等 用PH5.5PBS配制0.5%浓度 抗球蛋白试验（Coombs Test） 原理：红细胞被IgG、IgA、IgM或补体C3、C4致敏后当加入抗人球蛋白（即抗IgG、抗补体抗体）时，出现红细胞凝集 抗球蛋白试剂： 多特异性类除含有抗IgG和C3d外，还含有抗C3b、C4b、抗IgM、抗IgA，主要用于配血试验和直接试验（DAT），尤其用于自身免疫性溶血性贫血测定。 单特异性类：主要有抗IgG和抗C3d两种，主要应用于抗体阳性者分类鉴定 特点： （1）本试验是血清血型学试验中经典试验，用于各种血型抗原抗体鉴定中〕 （2）本试验同时要做各种对照试验“结果”方才可靠。对照试验包括阳性、阴性及自身对照 本试验影响结果的因素较多 免疫性溶血性输血反应的调查 一 询问症状和病史? 1 急性溶血性反应症状：常为ABO血型不合所至，误输几毫升血即发生强烈反应，注射部位疼痛、寒战、发热、胸闷、腰背痛、面部潮红、恶心、血压下降、胸口、休克、血红蛋白尿 RH血型不合在输完血数小时后发生，但症状轻 2 迟发性溶血反应症状：分两种原因 （1）红细胞初次刺激，7-8天产生抗体，再与输入存活的红细胞作用。（2） 曾有过初次刺激，本次是回忆反应，3-7天产生大量抗体，多数反应进程慢，个别与急性反应征状类似，有死亡危险 3病史： 二 核对患者身份和献血者血液 初步实验 1 比较输血前后患者血浆颜色 2 抗球蛋白实验 四 进一步检查 1 复核血型 2 重做交叉配血 3 抗体鉴定和相应抗原的检查 4 辅助检查 尿中有无血红蛋白 反应24小时后检查含铁血黄素 血清胆红素检查 出现反应1小时后升高，7——8小时达到高峰。 血清胆红素 尿胆红素和尿含铁血黄素的升高及结合珠蛋白降低都是溶血反应的 辅助证据。 5 追踪试验 反应初期直抗试验、间抗试验可能阴性 但以后每天或隔几天检查，可发现抗体阳性。 与非免疫性溶血反应的区别 1 血液在体外溶血 血袋保存、运输或加温不当，血袋内加入药物、输血器管道用过低渗液、浓缩红细胞因血浆太少—引发