组织培养术期末复习资料.doc

1．目前植物组织培养的农业应用主要是种苗快速繁殖和无病毒苗生产。 2. 组织培养的理论依据是： 植物细胞的全能性理论 。 3植物组织培养的类型有： 器官培养 、 组织培养 、 胚胎培养 、细胞培养、 原生质体培养 。 4. 1943年，white 提出了植物细胞 “全能性”学说 ，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新学科。 5. 组织培养实验室必要的设备有药品及仪器柜、无菌台、实验台、搁架（水槽）、培养架、消毒设备、接种器械、（冰箱、空调、排气扇、天平等）。 6. 接种室要求室内密封性好、长时间保持无菌，墙面密闭光滑，门为滑动拉门，并设置紫外线灭菌灯，防止出入时带进杂菌。 7. 紫外灯灭菌利用200~300波长左右的紫外光，他的灭菌强度弱，须离被灭菌物不超过1.2米。 8. 培养架一般长为1.2米，宽为0.5米（5层）。 9. 植物组织培养，从接种到商品苗可以分为五个阶段，他们是入选品种外植体的筛选和获取、外植体灭菌（接种）、初代培养、继代培养（继代扩繁）、诱导出芽生根、炼苗、驯化和包装。 二、名词解释 1.植物组织培养：指使用无菌方法使植物的离体器官、细胞、原生质体等在人为提供的条件下进行培养，使其长成完整的植株。 2.细胞全能性：植物的大多数由核细胞在适当的条件下都能由单个细胞经过分裂、生长、分化在适宜条件下具有发育成完整植株的能力。 三、问答题 1.根据你所学的知识和所查阅的文献，综述植物组织培养在生产上的应用，都有哪些成功的例子？ 答：自从Morell952年发现采用微茎尖培养方法可得到无病毒苗(virus free)后，微茎尖培养就成为解决病毒病危害的重要途径之一。兰花、园林植物的生产。 2.你认为植物组织培养在当前的农业生产上有什么价值？为什么？ 答：价值：保持母本优良性状、实现脱毒和扩繁，培养高价植物和稀有植物。提高农业生产经济效益。植物组织培养可以人为控制，产量高，生长周期短，繁殖率高，管理方便，经济效率高。 3.建立一个组培实验室怎样布局比较合理？ 答：应具有准备室 灭菌洗涤室 缓冲室 接种室 培养室 温室 辅助实验室，且无菌程度一次增加。 3.简述植物组织培养中褐变发生的原因及其防治措施答：原因：很多植物尤其在木本植物体内含有较多的酚内化合物，在完整植物体的细胞中，酚内化合物和多酚氧化物分隔存在，因此比较稳定。当植物体被切割后，切口附近细胞的分割细胞被打破，酚内化合物被多酚氧化酶氧化形成褐色的醌内化合物，醌内化合物又在诺氨酸酶的作用下，与外植体组织中的蛋白质发生聚合，进一步引起其他酶系统失活，导致组织代谢絮乱，生长受阻，最终逐渐死亡。措施：取材合适、母株和外植体的预处理、选择适宜的培养基和培养条件、外植体的连续转移、添加褐变抑制剂和吸附剂 4.外植体表面灭菌如何操作:答：外植体取材→预处理→无菌条件下70%酒精表面消毒30~60s→无菌条件下消毒剂处理→无菌水充分漂洗3~5次. 2.解决玻璃化现象的方法有哪几点？答：(改善培养环境(调控生理生化代谢 1. 配置培养基时，一般先配制母液，其目的在于节省配制时间和培养基的低温保藏、保证配制的准确性和配制时的快速移取。 2.培养基PH值一般调节为6.0~6.2左右，常用滴定酸碱试剂和加入缓冲剂方法来进行。 3. 培养基中缺铁会使幼苗失绿、延长生长，培养基中常以螯合态铁形式加入铁。 4. 磷是构成磷脂双分子层的主要成分，这种物质又是细胞膜、细胞核的重要组成部分，磷也是大量元素的成分，这是一种常见的直接能量物质。 5. 琼脂加入的浓度大约是6%-10%，蔗糖加入浓度大约2%~5%。 6． 6-BA/NAA（细胞分裂素/生长素）的高低决定着外植体的发育方向，其比值高时长芽，比值低时长根。 7. MS 培养基是无机盐浓度较高，为较稳定平衡的溶液。 8. 氮是蛋白质、酶、核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸等的组成成分。 9. 微量元素母液可配成100倍，配置培养基时移取10毫升。 1.大量元素种类：O C H N K P Mg S Ca Cl 2. 微量元素种类：Fe B、Mn、Mo、Zn、Cu、Fe 3.MS培养基：无机盐和离子浓度较高，且广泛用于植物的器官，花药，细胞和原生质体的培养的培养基。 4.母液：根据化学性质的不同，将各种药品配制成浓缩一定倍数的浓缩储备溶液。 1. 下列哪种不是培养基常用的维生素 A A．维生素B2 B. 维生素B1 C． 维生素B6 D. 维生素C 2. 下列哪种激素不属于生长素类 C 。A．IAA B. IBA C.6-BA D. NAA 3. 下面哪种是MS培养基大量元素所用药剂 A。A． 硫酸镁 B. 硫酸亚铁 C. 硫酸