第三章 蛋白质的化学（二）幻灯片.pptVIP

（ＨＣl中） ＤＮＰ－多肽 (2) （DNS法）丹磺酰氯(二甲氨基萘磺酰氯)反应 -HCl + 氨基酸混合物 水解 多肽 多肽 DNS-氨基酸 具有荧光 (3)Edman法（异硫氰酸苯脂反应） PITC 无N-端氨基的剩余部分 用层析法分离 (4) 氨肽酶法 从多肽链的N末端依次向内切 NH2 ---aa---aa---aa---aa……. 据一定时间内释放出的AA的数量和种类来推测. C-未端的测定方法 1.肼解法 是目前最好的方法 用色谱法鉴定 多肽与肼在无水条件下加热，C-端氨基酸即从肽链上解离出来，其余的氨基酸则变成肼化物。肼化物能够与苯甲醛缩合成不溶于水的物质而与C-端氨基酸分离。 注:末端若为半胱氨酸、天冬酰胺、精氨酸在肼解过程中易被破坏。 CH C R1 H2N O … CH C R（n-1） O H2N CH COOH Rn NHNH2 H2N + + + NHNH2 CH C R1 H2N O N H … CH C R（n-1） O N H C O N H CH COOH Rn NH2NH2 无水 100℃ （n-1）个氨基酸酰肼 C-末端氨基酸 氨基酸酰肼可与苯甲醛反应生成沉淀，与C-末端氨基酸分离 3.LiBH4还原法