(天然药物化学实验书合集2013.docxVIP

天然药物化学实验指导循环使用请勿带走目 录实验一 槐花米中芦丁的提取实验二 芦丁水解液的纸色谱鉴定实验三 大黄中大黄素的提取实验四 大黄中大黄素的柱色谱提纯实验五 苦参生物碱的薄层鉴定实验六 茶叶中咖啡因的提取实验一 槐花米中芦丁的提取芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophora japonica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。槐花米为豆科植物槐花的未开放花蕾。味苦性凉，具清热、凉血、止血之功。槐花的主要化学成分为芦丁，又名芸香甙，含量可达12-16%。芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。芦丁具有维生素P的作用。可降低毛细管前壁的脆性和调节渗透性，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，临床上用作毛细管脆性引起的出血症，并常用作防治高血压病的辅助治疗剂。现在国处也常用芦丁作食品及饮料的染色剂。一、实验目的1．通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。2．掌握黄酮类化合物的主要性质。二、实验原理芦丁属黄酮类化合物，分子中有较多酚羟基，具弱酸性，易溶于热碱中，酸化后又析出，因此可以用碱溶酸沉的方法提取芦丁，又利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差较大的特性进行重结晶精制。三、实验材料槐米、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、浓盐酸、广泛pH试纸、棉花等。四、实验内容称取槐米30g，在乳钵中研碎后，投入300ml 0.4％硼砂溶液的沸水溶液中煮沸2-3分钟，在搅拌下加入石灰乳调pH 9，煮沸40分钟（注意添加水，保持原有体积，保持pH8~9），趁热倾出上清液，用棉花过滤。残渣加100ml水，加石灰乳调pH 9，煮沸30分钟，趁热用棉花过滤，二次滤液合并。滤液保持在60℃，加浓HCl，调pH2-3，放置过夜，则析出芦丁沉淀。五、实验说明及注意事项1、加入饱和石灰水溶液既可达到碱溶液提取芦丁的目的，又可除去槐花米中大量多糖粘液质，更容易过滤。也可直接加入150mL水和1g氢氧化钙粉末，而不必配成饱和溶液。2、pH值过低会使芦丁形成烊盐而增加了水溶性，降低收率。六、思考题1．本实验提取过程中应注意哪些问题？2、根据这个实验，请总结出用酸碱调节法提取中药活性成分的适用条件及一般原理。实验二 芦丁水解液的纸色谱鉴定一、实验目的1．掌握纸色谱方法。2．掌握黄酮类化合物的色谱特点。二、实验原理芦丁可被稀酸水解，生成槲皮素及葡萄糖、李糖，并能通过纸层析鉴定。三、实验材料槐米、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、2％的硫酸溶液、浓盐酸、正丁醇、醋酸、氨水、1％的氢氧化钠溶液、1％的三氯化铝乙醇溶液、1％的葡萄糖溶液、1％的鼠李糖溶液、1％芸香苷乙醇溶液、1％槲皮素乙醇溶液、95％乙醇、碳酸钡、广泛pH试纸、中速层析滤纸等。四、实验内容（一）芦丁的水解取芦丁1g，研碎，加2％硫酸水溶液80ml，小火加热，微沸回流30-60min，并及时补充蒸发掉的水分。在加热过程中，开始时溶液呈浑浊状态，约10min后，溶液由浑浊转为澄清，逐渐析出黄色小针状结晶，即水解产物槲皮素，继续加热至结晶物不再增加时为止。抽滤，保留滤液20ml，以检查滤液中的单糖。（二） 糖的纸色谱检识取上述水解母液10ml小心用Ba(OH)2（大约1－1.5g , 并预先用10ml水调至成乳液）中和至中性，过滤出生成的BaSO4沉淀，滤液用热水浴小心浓缩至小体积1ml备用。取1张圆形滤纸, 用铅笔画出通过圆心的三条直线将滤纸等分为6份，对角点样法两次将样品、葡萄糖、鼠李糖标准品点于距圆心一定（0.5mm）处, 并将用其它滤纸卷成的滤纸芯通过圆滤纸的圆心，借助滤纸芯的毛细作用用正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上层溶液作径向展开。支持剂：新华层析滤纸（中速、20cmХ7cm）样 品：水解浓缩液对照品：a. 葡萄糖标准品水溶液b. 鼠李糖标准品水溶液展开剂：正丁醇：冰醋酸：水（4：1：5上层）显 色：a. 喷苯胺-邻苯二甲酸试剂，于105℃加热10min，显棕色或棕红色斑点 b.喷氨性硝酸银试剂，于100℃左右加热，呈棕褐色斑点。五、思考题1、芦丁酸水解时有何现象，如何解释？2、槲皮素和芦丁纸色谱鉴定时，用BAW（4：1：5）上层和下层展开后，解释两者的相对比移值大小关系？3、葡萄糖和鼠李