精选课件第二章 提取、分离、鉴定.ppt

2. 常用的提取方法： 4.①?官能团的极性大小： -COOHAr-OHR-OHR-CHOR-CO-R R-CO-OR R-O-RR-XR-H ②?化合物的极性大小：分子量、官能团的种类、数目、位置决定。 解答：1. 各类化学成分溶解性对照表 a、煎煮法 b、浸渍法 c、渗漉法 d、回流法 e、连续回流法（索氏提取Soxhlets extraction） 硅胶、氧化铝柱色谱法 —应用于化合物制备分离 柱层析分离模式 柱色谱 基本操作： 1.色谱柱制备 (干法 , 湿法) 2. 上 样 (干法 , 湿法) 3. 洗脱，合并相同洗脱液 柱色谱注意事项 玻璃柱规格：柱长度/直径≈15:1—20:1 吸附剂的用量：为分离样品量的30—60倍； 难分离样品，可提高至200倍。 吸附剂的规格：一般为100目颗粒，不加压； 若使用200-300目，需加压。 洗脱剂： 根据TLC判断，混合溶剂梯度洗脱； 常用系统：石油醚-乙酸乙酯、氯仿-甲醇等； 初始洗脱溶剂比例，控制Rf 0.2-0.3条件。 （2）活性炭 是非极性吸附剂，对非极性物质具有较强的亲和能力，目前主要用来除去植物提取液中的叶绿素等植物色素。 此外，从大量稀水溶液中浓缩微量物质时，有时也可采用活性炭简单吸附法。如，用活性炭吸附法从一叶萩水浸液中提取一叶萩碱。 一叶萩碱 (3)半化学吸附------- 聚酰胺液固吸附层析法（柱层、薄层）： 聚酰胺是由酰胺聚合而成的高分子物质，分子结构中有许多酰胺基。可与酚类、酸类、蒽醌类等成分形成氢键，因而产生吸附作用。 原理：各成分由于和聚酰胺形成氢键的能力不同，聚酰胺对其吸附能力也不同。 聚酰胺吸附色谱原理 吸附规律： ① 溶剂对聚酰胺的洗脱能力为: 水〈乙醇〈丙酮〈稀氢氧化钠〈甲酰胺〈二甲基甲酰胺〈尿素 在含水溶剂系统中：（总体上是反相色谱） ② 与聚酰胺形成氢键的基团越多，吸附越强 形成氢键的基团： 酚羟基、羧基、醌式羰基 ③ 能形成分子内氢键的化合物，吸附较弱 邻位-OH吸附〈间、对位-OH ④ 芳香核、共轭双键越多，吸附越强 例如： 应用范围： 对植物药中的黄酮类化合物的分离效果好，此外，在酚类、酸类、蒽醌类成分以及氨基酸的分离中也常用。 除去多元酚类杂质（如鞣质）可用聚酰胺。 返回 例：下列各化合物用聚酰胺柱层析分离，乙醇-水梯度洗脱，各成分洗脱次序 A B C D 【凝胶过滤法】 原理：凝胶的固定相是一类多孔材料，孔径分布有一定的范围，象一面筛子，对不同大小的分子进行筛分。当混合物进入流动相后，就向固定相孔隙内扩散，组分保留程度取决于孔径的大小和组分分子的大小。大分子成分先流出。 （4） 凝胶色谱法 凝胶过滤法原理 凝胶颗粒 大分子物质 小分子物质 凝胶色谱原理 凝胶种类和性质： ①Sephadex G ：葡聚糖凝胶，是由葡聚糖和甘油基通过醚桥相交联而成的多孔网状结构，亲水性，在水中溶胀。凝胶颗粒网孔大小取决于所用交联剂的数量。Sephadex G只适合于在水中应用，主要用于分离水溶性高分子化合物如多糖、蛋白质； ②Sephadex LH-20：羟丙基葡聚糖凝胶, 既有亲脂性又有亲水性，它是在Sephadex G-25的羟基上引入羟丙基而成醚状态，与Sephadex G比较，它分子中羟基总数不变，但碳原子所占比例相对增加，因此可以在水中及极性有机溶剂中膨胀使用，扩大了使用范围。 交联葡聚糖凝胶化学结构 交联剂越多（交联度高），网孔越紧密，孔径越小，吸水膨胀也越小； 交联剂越少（交联度低），网孔越稀疏，孔径越大，吸水膨胀也越大； 商品型号即按交联度大小分类并以吸水量（每1g干凝胶吸水量ml*10）表示。 如：Sephadex G-50为1g干凝胶吸水量5ml，商品型号越大分离的混合物的分子量越大。 Sephadex G-50分离范围（分子量）多糖为500~10000； Sephadex G-200分离范围（分子量）多糖为1000~200000 （5）离子交换树脂法 用于分离酸性、碱性及两性混合物 （1）定义： 用一种能交换离子的材料（离子交换树脂）为固定相，以水或含水溶剂为流动相来