精选课件第九章-生物碱类药物分析.ppt

供试品溶液的制备：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硫酸阿托品2.5mg ），置50ml量瓶中，加水振摇使硫酸阿托品溶解并稀释至刻度，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备：另取硫酸阿托品对照品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。 　　 例：硫酸阿托品片（05版药典） 测试方法： 精密量取供试品溶液与对照品溶液各2ml，分别置预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液2.0ml，振摇提取2 分钟后，静置使分层，分取澄清的三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA），在420nm的波长处分别测定吸光度，计算，并将结果与1.027 相乘，即得供试量中含有(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O的重量。 (C17H23NO3)2·H2SO4·H2O标示量%= Ax/AR × CR × 50 × 1.027 ×平均片重 W×标示量 ×100% 1.027：质量换算因数，指1g无水硫酸阿托品相当于硫酸阿托品的量。由下式求得： (C17H23NO3)2·H2SO4·H2O的分子量 (C17H23NO3)2·H2SO4的分子量 =1.027 四、紫外-可见分光光度法 五、荧光分析法 六、高效液相色谱法 让同学总结学过的游离生物碱：秋水仙碱、利血平、咖啡因 * 罂粟碱，苄基异喹啉，一个吡啶环。 * 平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。旋转的度数，称为旋光度。偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。 * 结晶紫的碱式色为紫色，酸式色为黄色。不同酸度下，变色比较复杂、由碱式到酸式，变为紫、蓝、绿、黄。还和生物碱碱性有关系。 * 请同学回忆学过的氢卤酸盐有哪些？ * 适用于碱性比较强的的药物分析。(Pkb=6-9) * * 三、色谱法 硫酸奎宁中其它金鸡纳碱的检查 检查方法：供试品溶液自身稀释对照法 有关物质的检查 方法：HPLC 旋光法* 硫酸阿托品（05版药典） 【检查】莨菪碱 取本品，按干燥品计算，加水制成每1ml 中含50mg的溶液，依法测定（附录Ⅵ E），旋光度不得过－0.40°。（已知莨菪碱的比旋度为-32.5 ° ）求杂质限量是多少？ -0.4° -32.5° =0.0123g/ml=12.3mg/ml 12.3 50 =24.6% ×100% 第四节 含量测定 一、非水滴定法（非水碱量法） (一)原理和方法 游离生物碱：生成生物碱的高氯酸盐 生物碱盐：置换滴定，即强酸滴定液置换出与游离碱结合的较弱的酸。 BH+·A- + HClO4 BH+·ClO4- + HA （二）测定条件的选择 适用范围及溶剂的选择 Kb＞10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂； Kb为10-10-10-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合液作为溶剂； Kb ＜10 -12时，选用醋酐作为溶剂。 2.酸根的影响 酸根在冰醋酸中的酸性： 高氯酸＞氢溴酸＞盐酸＞硫酸＞硝酸＞其它弱酸 （磷酸、有机酸） 若滴定过程中置换出的HA酸性较强，反应将不能进行到底，需进行一定处理，以排除HA的干扰。 3. 指示终点的方法 电位法：玻璃—甘汞电极系统 指示剂法：结晶紫 （三）、测定实例** 1、游离弱碱性生物碱药物的含量测定 （咖啡因） 咖啡因的碱性很弱（pKb为14.1），所以选用酸酐－冰醋酸作为溶剂，可使突跃显著增大。 4个N，但只有一个N碱性稍强，故滴定时，1mol的高氯酸相当于1mol的咖啡因。 （1）一般均预先在溶液中加入Hg(Ac)2 的冰醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰。 ※理论量1～3倍 2. 氢卤酸盐的测定 汞污染 （2）筛选溶剂，达到终点易观察的目的，同时采用电位法指示终点。 （3）部分采用HPLC进行含量测定 取本品约 0.15g，精密称定，加冰醋酸 10ml，加热溶解后，加醋酸汞试液 4ml 与结晶紫指示液 1滴，用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定至溶液显翠绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每 1ml 高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于 20.17mg 的C10H15NO· HCl。 盐酸麻黄碱 ChP(2005) 生物碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至生物碱的硫酸氢盐。 3. 硫酸盐的测定 （1）硫酸阿托品 HClO4直接滴定时，反应摩尔比为1∶1 （2）硫酸奎宁 HClO4直接滴定时，反应摩尔比为1∶3 （C20H24N2O2·H+）2