微生物学4说课.ppt

形态极其微小,必须在电镜下才能观察,一般都 具过滤性; 电子显微镜法(利用负染法) 典型病毒粒子的构造病毒粒子的对称体质病毒的群体形态和和 典型病毒粒子的构造和 病毒粒子的对称体质 螺旋对称 包涵体（inclusion body） 噬菌斑(plaque) 空斑和病斑 在动物细胞培养物上的与噬菌斑类似的空斑,称为病斑.因为受肿瘤病毒感染. 枯斑 三类典型形态的病毒 螺旋对称的代表-烟草花叶病毒(tobao mosaicvirus,TMV) 二十面体对称的代表-腺病毒(Adenovirus) 病毒的蛋白质 构成病毒外壳,保护病毒核酸免受核酸酶及其他理化因子的破坏 病毒的核酸 DNA,RAN之分 其它化学成分 脂类 糖类 各类病毒及其繁殖方式 增殖过程中基因表达特点 基因表达有先有后 基因表达的顺序为:早期表达;次早期表达;核酸复制;晚期表达 前一次表达产物是后一次表达的MRNA 聚合酶 晚期表达的结果是合成了各种装配蛋白(另外还有溶菌酶) 病毒核酸的复制 双链DNA的复制: (±)DNA→ (±)DNA 单链DNA的复制: +DNA → -DNA → ±DNA → +DNA 双链RNA的复制: ±RNA →+RNA →-RNA →± RNA +RNA复制: +RNA →-RNA →± RNA →+RNA -RNA复制: -RNA → +RNA(mRNA) →Pr(RNA复制酶) 逆转录病毒单链RNA的复制: +RNA → (-)DNA → (±) DNA →+RNA肿瘤病毒 病毒核酸的转录 含±DNA的病毒:±DNA →mRNA +DNA病毒:+DNA →±DNA →mRNA 含±RNA病毒:±RNA →mRNA 含+RNA病毒:+RNA →±RNA →mRNA 含-RNA病毒:-RNA →mRNA 最后:大肠杆菌死亡并破裂，释放出里面的病毒，新一代病毒开始新的生命旅程 噬菌体增殖规律的描述方法 昆虫病毒做为生物农药优点： What is a virus? 拟病毒(virusoids) 是包裹在动植物病毒粒子中的类病毒 探索核酸的结构与功能 探索RNA-2和RNA-1间的关系 组建弱毒疫苗 探索病毒本质和生命起源 Cncnc-micro 朊病毒(prion,virino) 疯牛病(海绵状脑病) 一种感 染性蛋白粒子致病因子称朊病毒 PrPc已被克隆,空间结构由a__螺旋构成 朊病毒可由a_螺旋(PrPc) 变成b__折叠(PrPsc) PrPsc为致病型蛋白粒子 PrPsc在神经细胞内沉积 细胞破裂 组织出现无数空洞------状如筛子称为海绵状脑病 朊病毒的三维结构 朊病毒(prion,virino) PrPsc 克病最初病例养殖场主 克病潜伏期可达数十年 克病可通过血液传染 海绵状脑病 羊 肉 干 粉 疯牛病 牛 PrPc PrPsc ？ 病羊肉 病牛肉 人 不致病 克雅氏病 PrPc Cncnc-micro 左图：病毒核酸链接 入寄主核酸链 右图：病毒核酸复制 病毒核酸的复制 ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 微生物与人类生活 噬菌体效价的测定 效价指噬菌体悬液的浓度。即噬菌体数/ml样品。 斑点试验法 液体稀释管法 双层平板法 单层平板法 快速玻片法 Cncnc-micro 45C培养 涂布菌液液 · · ·· 点样 · · 噬菌斑 斑点试验法 液体稀释管法 试样（ 未知效价的噬菌体液） 培养液和宿主细胞 计数管中完整宿主细胞数 （定时取样对活细胞计数） 噬菌体数=原细胞数 — 活细胞数 双层平板法 琼脂平板 菌液+噬菌体试样+琼脂培养基 培养10天 计数噬菌斑 噬菌斑数=试样中噬菌体数 快速玻片法 试样+宿主细胞 +琼脂培养基 低倍镜下计数噬菌斑 充分混匀 短期培养 布在灭菌玻片上 离 心 术 抗病毒血清 培养 定时取样测噬菌斑数 以培养时间为横坐标，以噬菌斑数为 纵坐标，绘出的曲线为一步生长曲线。 溶源性 温和噬菌体特点： 游离态 温和噬菌体存在形式：整合态