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选修1复习 实验1、大肠杆菌的培养和分离 实验2、分离以尿素为氮源的微生微 实验4、果汁中的果胶和果胶酶 实验6、α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 实验8、果酒及果醋的制作 实验10、泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 实验11、植物的组织培养 培养基 微生物 大肠杆菌的培养和分离 分离以尿素为氮源的微生微 果汁中的果胶和果胶酶 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 果酒及果醋 的制作 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 植物的组织培养 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 培养基的种类: 种类 说明 实例 按物理性质命名 固体培养基 半固体培养基 液体培养基 选择培养基 按用途命名 LB培养基 MS培养基 植物组织培养 发芽培养基 生根培养基 分离菌种、保存菌种 扩大培养菌种 通用的细菌培养基 MS培养基+BA+NAA 尿素培养基 MS培养基+NAA 植物组织培养 实验2中的全营养LB固体培养基、尿素固体培养基 蛋白胨 酵母提取物 葡萄糖 K2HPO4 尿素 NaCl 水 琼脂糖 酚红 全营养 LB培养基 √ √ √ √ √ 尿素 培养基 √ √ √ √ √ √ √ LB通用培养基 蛋白胨 酵母提取物 NaCl 水 琼脂 实验1中的LB固体培养基: 实验8中的培养醋化醋杆菌的液体培养基(1L): 蛋白胨3g、酵母提取物5g、甘露醇25g。用300mL的锥形瓶振荡培养48h后,在接种到发酵瓶中 MS培养基配方 大量元素 mg/L 微量元素 mg/L 有机成分 mg/L NH4NO3 1650 KI 0.83 肌醇 100 KNO3 1900 H3BO3 6.2 烟酸 0.5 CaCl2·H2O 440 MnSO4·4H2O 22.3 盐酸吡哆醇 0.5 MgSO4·7H2O 370 ZnSO4·7H2O 8.6 盐酸硫胺素 0.1 KH2PO4 170 NaMoO4·2H2O 0.025 甘氨酸 2.0 CuSO4·5H2O 0.025 蔗糖 30 CoCl2·6H2O 0.025 Na-EDTA 37.3 FeSO4·7H2O 27.8 用途 成分 LB培养基 细菌培养 蛋白胨、酵母提取物、氯化钠 MS培养基 植物组织培养 大量元素、微量元素、有机成分(蔗糖、维生素、氨基酸等) MS培养基与LB培养基最大的区别是: 植物组织培养所用的培养基为MS培养基,微生物培养基(LB培养基)以有机营养为主,MS培养基则需提供大量无机营养,无机营养包括植物生长必需的大量元素和微量元素两大类。 灭菌方法: 待灭菌物品 灭菌方法 注意事项 玻璃器皿 高压蒸汽灭菌法 121℃,1Kg/cm2,15min 培养基 尿素 过滤灭菌法 使用G6玻璃砂漏斗 接种环 灼烧法 高压蒸汽灭菌时, 如果培养基中有葡萄糖,为防止葡萄糖碳化,要用500g/cm2(90℃以上)灭菌30min(P21第二节倒数第6行) 灭菌后,通常将实验用具放入60-80 ℃的烘箱中烘干,以除去灭菌时的水分 称量溶解 调 pH 灭菌 倒平板(培养皿) 搁置斜面(试管) 扩大培养 分离 保存菌种 ①高压蒸汽灭菌 ②121℃,1Kg/cm2 15min 器皿 灭菌后的操作 用途 ①空白培养皿 被倒平板 分离 固体培养基 倒平板 / ②锥形瓶 液体培养基 / 扩大培养 ③试管(固体培养基) 搁置斜面 保存菌种 ①培养皿(倒置) ②固体培养基 ③恒温培养箱(37℃) ①试管斜面 ②固体培养基 ③恒温培养箱(37℃) →冰箱(4℃) ①锥形瓶 ②液体培养基 ③摇床(37℃振荡培养) 培养皿(正放) 若是培养基中加入葡萄糖,则高压蒸汽灭菌时,为防止碳化,要用500g/cm2压力(90℃以上)灭菌30min; 若是培养基中含有尿素,则除尿素以外的其他物质用高压蒸汽灭菌法灭菌,待冷却至60℃时,加入通过G6玻璃漏斗过滤的尿素溶液 培养基 微生物 大肠杆菌的培养和分离 分离以尿素为氮源的微生微 果汁中的果胶和果胶酶 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 果酒及果醋 的制作 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 植物的组织培养 固体培养基 液体培养基 固体培养基 大肠杆菌 含脲酶的菌 黑曲霉 苹果青霉 枯草杆菌 酵母菌 醋杆菌 乳酸菌 假丝酵母 LB固
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