枯草芽孢杆菌发酵产碱性蛋白酶条件的研.docVIP

枯草芽孢杆菌发酵产碱性蛋白酶条件的研究 摘 要： 利用单因素法对枯草芽孢杆菌发酵产碱性蛋白酶的培养基成分进行优化，确定发酵培养基各成分最适宜配比。最后确定了该菌株的最适发酵培养基配方为(g/ 100 mL) :棉籽饼粉3.0 ,酵母浸粉1.75 ,麦芽糊精10 ,柠檬酸钠0.13 ,CaCl2 0.13 。K2HPO4 1.0 ;最适摇瓶发酵条件为:接种量2 % ,装液量50 mL/ 250 mL ,摇床转速200 r/ min ,34 ℃,发酵54 h ,碱性蛋白酶的发酵单位可达1648.8u/ mL。此外,还进行了5 L 罐放大实验,在5 L 罐所确定的最适工艺条件下,发酵单位可达 520.2 u/ mL 。 关键词： 碱性蛋白酶；枯草芽孢杆菌；发酵；培养基 引 言　 碱性蛋白酶是指在碱性条件下水解蛋白质肽键的酶类,主要应用于生产加酶洗涤[1] ,另外,在制革、丝绸、医药、食品、饲料和生物化学试剂等领域也有应用。我国在20 世纪70 年代初期就成功开发了碱性蛋白酶,并实现了工业化生产[2] 。目前,我国用于生产的菌种为国内学者自行筛选诱变的菌株———枯草芽孢杆菌,其发酵单位在10 000 u/ mL ,与国外先进水平相差甚远[3]。本实验所采用的产碱性蛋白酶菌株为枯草芽孢杆菌,其实验发酵单位为22 000 u/ mL,与国外大型酶制剂公司所报道的生产水平30 000 u/