活性氧和性氮的生成和处理.docVIP

第九章 活性氧和氮物种的合成与代谢 朱小桢（译） 最近的25年，在运动生理学活性氧和氮的作用已相当的重视。已证明体力活动通过机制诱导增强氮物种的产生。在这种背景下，氮物种产生似乎影响到运动生理学研究的重要机制。活性氧和氮物种作为信号分子的重要作用德勒格α（TNF - α）刺激血管平滑肌细胞的NADPH氧化酶，而内皮细胞对机械力作出反应。最近，在大鼠的实验中显示，一个非线粒体NADPH氧化酶酶复合物存在于骨骼肌纤维内部。它具有类似于非吞噬细胞的NADPH氧化酶的特性，并有助于骨骼肌基底活性氧的形成。（Javesghani等人2002）。 超氧自由基（.O2-）通过线粒体电子传递链氧化还原反应的半醌化合物连续地产生。在线粒体氧化磷酸化的过程中，分子氧发生四电子还原。这反一应是由细胞色素氧化酶催化的，并用于大约90％至98％的氧气消耗。其余的氧发生单价还原形成超氧阴离子.O2- (哈利韦尔1998），这一过程发生在所有含线粒体的细胞中，以及似乎随着年龄的增长而进一步增强（德赛等人1996）。在更深一层的步骤中，生成的超氧阴离子.O2-可以通过铁催化的反应转换成.OH。在文献中，关于线粒体中的总电子通量的估计显示出，通过电子漏并导致.O2-形成程度存在1％至5％之间（(哈利韦尔1998）。因此，可以认为，线粒体电子传递链是量化活性氧形成的最重要的机制。 黄嘌呤氧化酶主要位于血管内皮细胞，能催化次黄嘌呤转化成黄嘌呤，进而生成尿酸。黄嘌呤氧化酶通常以脱氢酶的形式存在体内（XD黄嘌呤脱氢酶），它利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）作为电子受体，形成极大量的活性氧（罗伊和麦科德1983）。通过激活钙依赖性蛋白酶巯基氧化或蛋白水解能导致黄嘌呤脱氢酶转换成黄嘌呤氧化酶，其中后者在催化作用中利分子氧形成超氧自由基（Parks 和Granger 1986）。这种活性氧的生成过程已经在代谢性应激下被研究，在细胞缺氧复氧损伤中起着特殊的作用（Granger 1988）。此外，缺氧或局部缺血与磷酸腺苷（AMP）的积累相关联，是由于受损三磷酸腺苷（ATP）再合成的结果。磷酸腺苷（AMP）进一步转化为肌苷酸（IMP），导致次黄嘌呤的水平增加，这是黄嘌呤氧化酶的主要底物。游离铁已被证明能催化活性氧的生成。一个著名的的铁催化生成活性氧的机制是芬顿反应，其将过氧化氢（H 2 O 2）转换成更多的羟基自由基（芬顿1894）。通过还原Fe3 +为Fe2+，超氧阴离子.O2—可以增加铁离子对芬顿反应的的有效性（1998）。铜也与H2O2形成反应的潜力（Haber? Weiss?1943）。此外，同样通过脂氧合酶转换花生四烯酸白三烯已被确定为活性氧的一个来源（os et al. 1995）。然而，在形成花生四烯酸代谢的潜在作用尚未明确。Lincoln 等人1997年）。神经型一氧化氮合酶和内皮型一氧化氮合酶表现出组成型表达，并且预成型蛋白获得活性时钙离子内流以及结合钙调蛋白。血管通过内皮型一氧化氮合酶形成一氧化氮，是直接通过增加血液流动和剪切力来促进的（Cooke等人，1991）。由于损伤或肌肉机械活动，神经型一氧化氮合酶蛋白表达增加，而神经损伤后它的表达会降低（斯塔姆勒和迈斯纳2001）。神经型一氧化氮合酶和内皮型一氧化氮合酶产生低水平的一氧化氮活化，不超过微微摩尔。相比之下，诱导型一氧化氮合酶的活性不依赖于细胞内钙离子，主要由信号转导通路转录水平进行调控，涉及核因子-kB、丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）、蛋白激酶C、和低氧诱导因子-1（HIF-1）（波格丹2001；温格2000）。一旦表达，诱导型一氧化氮合酶生成一氧化氮的含量很高，这一过程可以持续几个小时甚至几天。 免疫活性细胞 在刺激过程中，中性粒细胞和巨噬细胞可以通过激活吞噬细胞亚型的NADPH氧化酶产生大量的超氧化物及其活性衍生物（博格达等人，2000）。此外，NADPH氧化酶也存在于嗜酸性粒细胞中，可以诱导活性氧的形成（Lindsay和Giembycz 1997）。 活性氧在免疫细胞的形成是一系列酶控制和非酶促反应（图9.1）。中性粒细胞氧分子初NADPH氧化酶O2?—。在接下来的步骤中，超氧化物歧化酶超氧化物歧化产生H2O2 。过氧化氢通过髓过氧化物酶（MPO）的催化进一步转化为次氯酸（HOCI）。次氯酸是最强的氧化杀菌剂，也是呼吸爆发的酶级联反应中的最终产物（Weiss 1989）。 刺激中性粒细胞和单核/巨噬细胞产生活性氧受复杂的调控机制的影响。脂多糖（LPS）和多种细胞因子或趋化因子是重要的活化剂和吞噬细胞NADPH氧化酶调节剂。白细胞介素8有着特殊的作用，因为它不仅能诱导形成活性氧，也有许多其它生物学特性，如对细胞迁移和粘附分子表达的诱导（Baggiolini等人1995）。证据表明，在中性粒细胞