灭活剂、护剂和免疫佐剂.ppt

第三节 免疫佐剂 一、佐剂概念与作用机理 1. 佐剂（新概念）：凡是可以增强抗原特异性免疫应答的物质称为佐剂。 佐剂（旧概念）：当一种物质先于抗原或与抗原混合或同时注射于动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答,发挥其辅佐作用的物质. 以前作为佐剂使用时没有免疫原性，但现在有所改变，如IL-2是佐剂和IL-8一类细胞因子佐剂却不一样, 具有免疫调节和免疫增强作用,单独使用时却具有免疫原性。 注意:佐剂和免疫增强剂的关系? 有时佐剂也是免疫增强剂. 2、佐剂作用机理： 机理非常复杂，但可概括三个方面。（不同书有不同写法） ①抗原储存库延长抗原储存时间，延长抗原释放，加强抗原降解等； ②形成肉芽肿，促进炎症反应，增强吞噬细胞吞噬作用； ③刺激淋巴细胞增殖和转化。 二、佐剂分类 不溶性铝盐类佐剂 油水乳剂佐剂 常用佐剂免疫 蜂胶佐剂 细胞因子佐剂 佐剂 微生物及代谢产物佐剂 免疫刺激复合物（Iscom） 新型免疫佐剂 脂质体佐剂（Liposomes） MF59佐剂 一）常用免疫佐剂 1、铝盐类佐剂 氢氧化铝胶：主要用于兽用细菌灭活苗（20%乳胶液） 2、油水乳剂佐剂 油乳佐剂是指一类由油类物质和乳化剂按一定比例混合形成的佐剂。 弗氏佐剂：矿物质（液体石蜡）、乳化剂（羊毛脂）、卡介 苗组成 的油包水乳化佐剂（三种成分俱全成为弗 氏完全佐剂，不含卡介苗或死结核杆菌的为弗氏 不完全佐剂）很少用于疫苗，因为太稠，注射困 难，但在实验中应用广。 矿物油：白油 白油佐剂 乳化剂：司苯-80、硬脂酸铝、吐温-80 。 油乳剂疫苗生产方法见书上55页。即油乳佐剂和病毒液或菌液按一定比例混合，经搅拌（高油）或胶体磨乳化而成 油乳剂疫苗：4℃以上保存，不能冻结，否则易分层即破乳（常温下保存1年以上，都不分层）。 3、蜂胶佐剂（见书） 二) 新型免疫佐剂 1、细胞因子类佐剂（相当于胸腺肽、干扰素等因子作用） 干扰素（α、β（抗病毒）γ（免疫调节，抗肿瘤） 细胞因子 白细胞介素（IL-1、 IL-2、IL-6、IL-12、 IL- 18…IL-21） 肿瘤坏死因子（TFN-α, TFN-β 集落刺激因子 2、CpG DNA:是含有非甲基化CpG基序的脱氧核糖核酸DNA，能诱生强烈的免疫应答反应。 3、基因工程减毒素：蛋白质毒素具有良好的抗原性，所以具有免疫佐剂作用，但不能直接作佐剂需要减毒。 4、免疫刺激复合物（immunostimulating complexes, Iscom）：是由抗原物质（20多种病毒的亲水蛋白或细菌膜蛋白等）和Quil A（皂树皮提取的一种糖苷)与胆固醇按1:1:1混合后具有较高免疫活性脂质小泡，可长期增强特异性抗体应答。 5、脂质体佐剂：是人工合成的具有单层或多层单位膜结构的脂质小囊，具有佐剂兼载体效应。 目前Iscom和脂质体（Liposomes）被认为是制备亚单位疫苗的理想载体和免疫佐剂。 白油佐剂 国内外常用白油：Drakocel-6VR、Marcol-52和Lipolul-4 7号或10号白油 质量标准: 无色无味 50℃运动粘度7m2／s左右 紫外吸收A250-350＜0.1％，紫外消光系数＜12×108； 单环芳烃与双环芳烃含量低于0.5％，无多环芳烃； 小鼠腹腔注射0.5ml或家免皮下注射2.0ml白油，观察60d， 表现正常。 乳剂配方与乳化方