浮游菌的测试操作规程.docVIP

目的：制订本标准的目的是建立洁净区浮游菌测试标准操作规程，规范了浮游菌的测试方法和要求，保证兽药在规定的洁净级别内进行生产。 依据：中华人民共和国农业部第11号令《兽药生产质量管理规范》； 中华人民共和国国家标准GB/T 16293—1996《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》 范围：本标准适用于洁净室和洁净区、无菌室或无菌区域（包括洁净工作台）的浮游菌的测定和环境的验证。 责任：微生物检验员对本标准的实施负责。 正文： 本标准采用下列定义 洁净室（区） 对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。 洁净工作台 一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。其特点是自身能够供给经过滤的空气或气体，如垂直层流罩、水平层流罩、垂直层流洁净工作台、水平层流洁净工作台、自净器等。 菌落 细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。通常用个数表示。 浮游菌 用本标准提及的方法收集悬浮在空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 浮游菌浓度 单位体积空气中含浮游菌菌落数的多少，以计数浓度表示，单位是个/m3或个/L。 悬浮粒子 可悬浮在空气中的尺寸一般在0.001μm～1000μm之间的固体、液体或两者的混合物质，包括生物性粒子和非生物性粒子。 洁净度 洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径的悬浮粒子允许统计数。 单向流 沿着平行流线，以单一通路以一定流速向单一方向流动的气流。 非单向流 具有多个通路循环特性或气流方向不平行的，不满足单向流定义的气流。 静态测试 洁净室（区）净化空气调节系统已处于正常运行状态，工艺设备已安装，洁净室（区）内没有生产人员的情况下进行的测试， 动态测试 洁净室（区）已处于正常生产状态下进行的测试。 测试方法 方法提要 本方法采用计数浓度法，即通过收集悬游在空气中的生物性粒子于专门的培养基，经若干时间，在适宜的生长条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，从而判定洁净环境内单位体积空气中的活微生物数，以此来评定洁净室（区）的洁净度。 所用的仪器、设备和培养基 a)浮游菌采样器 b)真空抽气泵 c) 培养皿 d) 培养基 e) 恒温培养箱 浮游菌采样器 浮游菌采样器宜采用撞击法机理的采样器，一般采用狭缝式采样器或离心式采样器。 采用的浮游菌采样器必须要有流量计和定时器。 狭缝式采样器的原理 狭缝式采样器由附加的真空抽气泵抽气，通过采样器有缝隙式平板，将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基表面上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落，予以计数。 离心式采样器的原理 离心式采样器由于内部风机的高速旋转，气流从采样器前部吸入从后部流出，在离心力的作用下，空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固形培养条上，经培养后形成菌落，予以计数。 狭缝式采样器的使用要点 应严格按仪器说明书的要求进行操作。 校验 采样器必须按仪器的检定周期，定期对仪器作检定，以保证测试数据的可靠性。校验的项目有：定时器、转盘转速、流量计。 每次测试前应按说明书上的规定，先接通电源，启动真空抽气泵，然后调节流量计及定时器。 空气采样量根据需要选定。已知采样器的流量（L/min），设定采样时间（min）,两者相乘即采样量（L）。 注意事项 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造。 采样管严禁渗漏，内壁应光滑 。 采样管的长度应根据测点的高度定，尽量减少弯曲。 真空抽气泵 真空抽气泵的排气量应与采样器匹配。 宜采用无油真空抽气泵，必要时可在排气口安装气体过滤器。 真空抽气泵安装的位置必须适当，一般装在采样器下面。 培养皿 狭缝式采样器一般采用φ150mm×15mm、φ90mm×15mm、φ65mm×15mm三种规格的硼硅酸玻璃培养皿。可根据所选用采样器选择合适的培养皿。 离心式采样器采用专用的固形培养条。 培养基 普通肉汤琼脂培养基或其它药典认可的培养基。 恒温培养箱 必须定期对培养箱的温度计进行检定。 测试步骤 测试前仪器、培养皿表面必须严格消毒。 采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，用于100级洁净室的采样器宜一直放在被测房间内。 用消毒剂擦净培养皿的外表面。 采样前，先用消毒剂消毒采样器的顶盖、转盘以及罩子的内外面，采样结束，再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。 采样口及采样管