现代分析术重点.doc

第一章 样品前处理技术 1、净化技术主要包括那些技术？ 液-液萃取法------液体样品、固相萃取（液相色谱分离）------液体、固相微萃取-----液气、柱层析 2、固相萃取有哪几种模式？ A、反相固相萃取 流动相：极性（水溶液）或中等极性 固定相：非极性。 分离对象：中等到非极性物质。 应用：可以从强极性的溶剂中吸附非极性到中等极性的化合物。 B、正相固相萃取 流动相：非极性、中等极性 固定相：极性。 分析物质：极性、中等极性、非极性 应用：从非极性溶剂样品中吸附极性化合物 C、离子交换固相萃取 适用于带有电荷的化合物（水溶液、有机溶液）。 原理：静电吸引，化合物上的带电荷基团与键合硅胶上的带电荷基团之间的吸引。 分为：阴离子交换和阳离子交换。 【正相或反相固相萃取选择原则：样品提取溶剂】 样品基体是强非极性溶剂，如正己烷，二氯甲烷等，一般要选用正相柱分离。 样品基体是强极性溶剂，如水和甲醇，乙腈及丙酮的混合液，要选用反相柱分离。 3、固相萃取的操作步骤是什么？ （1）活化吸附剂 （2）上样（吸附） （3）洗涤（去除杂质） （4）洗脱和收集 4、固相微萃取技术的关键是什么？ 关键：选择石英纤维上的涂层（吸附剂），要使目标化合物能吸附在涂层上，而干扰化合物和溶剂不吸附。 原则：目标化合物是非极性时选择非极性涂层；目标化合物是极性时选择极性涂层。 5、柱层析按原理可分为哪五类？ 名称 分离原理 吸附层析法 组分在吸附剂表面吸附，固定相是固体吸附剂，各能力不同 分配层析法 各组分在流动相和静止液相（固相）中的分配系数不同 离子交换层析法 固定相是离子交换剂，各组分与离子交换剂亲和力不同 凝胶层析法 固定相是多孔凝胶，各组分的分子大小不同，因而在凝胶上受阻滞的程度不同 免疫亲和层析法 固定相只能与一种待分离组分专一结合，以此和无亲和力的组分分离 第二章 色谱技术 1、色谱定义？（原理） 色谱法：利用混合物中各组分在两相中分配系数不同，当流动相推动样品通过固定相时，在两相中进行连续反复、多次分配，从而形成差速移动，达到分离。 2、色谱图中哪些是定性参数？哪些是定量参数？ 定性：保留时间tR 峰宽Y1 半峰宽Y1/2 定量：峰高 峰面积 3、理论塔板数的物理意义？ N的物理意义： 说明组分在柱中反复分配平行的次数的多少，N越大，平衡次数越多，组分与固定相的相互作用力越明显，柱效越高。色谱峰越窄，塔板数N就越大，塔板高越小，柱效越高。因而N或H作为描述柱效能的一个指标。 4、GC、HPLC流程图及组成部件？ GC 气相色谱一般流程 2·2·1 气路系统：氧气，氢气（绿色）、氮气（黑色）、CO2或氩气,氦气等惰性气体(灰色) 。 进样系统：注射器进样、阀门进样 色谱分离系统：柱室 温控系统：汽化室、柱室、检测器 检测系统：TCD、FID 信号处理系统：记录仪、色谱处理机、色谱工作站 组成部分：进样器、色谱柱、温控炉、检测器 HPLC 2.3.3 HPLC的一般流程 1） 高压输液泵 2) 进样装置 3) 色谱柱 4) 检测器 HPLC仪由流动相输送系统、进样系统、色谱分离系统、检测系统和数据处理系统组成。 5、GC检测器类型及各类型特点？ 1）热导池检测器（TCD）属于通用型，不破坏样品，但灵敏度较低。 2) 氢火焰离子化检测器（FID）专属型，破坏样品，灵敏度高，对象-----含C的有机物。 3) 电子捕获检测器（ECD）专属型，对象-----含卤素、S、N、P 6、HPLC检测器类型及各类型特点？ a. 紫外可见光检测器：应用最广，对大部分有机化合物有响应。 特点：灵敏度高；线形范围高；流通池可做的很小（1mm × 10mm ，容积 8μL）；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。 b 荧光检测器 灵敏度高，选择性好，可用于梯度洗脱。 对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应。 c 示差折光检测器 第三章 质谱技术 1、质谱定义？（原理） 气体分子或固体、液体的蒸气受到一定能量的电子流轰击或强电场作用，丢失价电子生成分子离子；同时，化学键也发生某些有规律裂解，生成各种碎片离子。这些带正电荷的离子在电场和磁场的作用下，按质荷比（即质量与电荷比值m/e）的大小分开，排列成谱，记录下来即为质谱（Mass Spectroscopy)。 2、质谱仪的组成部分及三个基本功能？ 质谱仪的操作主要通过其三个基本功能来实施。首先必须使分子离子化，它通过在离子源中进行电子电离、快速原子/离子轰击、基体辅助激动解吸或电喷雾来实现；其次，带电分子的离子及其碎片必须根据其质荷比来得到分离，这往往在质