10章 酶反应动力学-教学用精品课件.pptVIP

五、酶的抑制作用 (一) 抑制作用的概念 (二) 抑制作用的类型 (三) 可逆抑制的动力学 (四) 酶抑制剂应用举例 研究抑制剂对酶的作用的意义： 药物作用机理和抑制剂型药物的设计与开发：抗癌药； 阐述某些代谢途径，控制发酵； 研究酶的催化机制，是酶工程和化学修饰酶、酶工业的基础。 无机离子的激活作用具有选择性； 不同离子之间有拮抗作用，如Na+与K+、Mg2+与Ca2+，但Mg2+与Zn2+常可替代； 激活剂浓度要适中，1~50mM，过高往往有抑制作用； 许多金属离子是酶的辅助因子，有些金属离子可稳定酶分子的活性构象，有的金属离子通过生成螯合物，在酶与底物结合中起桥梁作用。 要说明的几个问题： 使一些本来有活性的酶活性进一步提高，主要是离子或简单有机化合物； 激活酶原，无活性→有活性，可能是离子或蛋白质。 激活剂作用包括两种情况： 一、有关的化学动力学概念（自学）二、底物浓度对酶促反应速率的影响三、多底物的酶促反应四、影响酶促反应速率的其他因素五、酶的抑制作用 教学内容 抑制剂： 不引起酶蛋白变性，和酶分子上某些必需基团（活性中心上一些基团）结合，引起酶活性下降，甚至丧失。抑制剂有选择性。 抑制作用： 使反应速率减慢或完全停止（不可逆抑制、可逆抑制） 变性剂： 使酶蛋白变性而引起酶活力降低或丧失。无选择性，涉及整个三级结构。 抑制程度表示方法： 相对活力( a )；抑制分数( i ) (一)抑制作用的概念 不可逆抑制作用 可逆抑制作用 （二）抑制作用的类型 抑制剂与酶的结合是非共价的、可逆的，可以用透析或超过滤等方法除去抑制剂，使酶活性恢复。 抑制剂 I 与游离酶 E 和 ES 之间存在平衡关系，抑制程度由酶对抑制剂的亲和力、抑制剂浓度和底物浓度三者所决定的。 这类抑制可用米-曼氏动力学方程进行分析。 1. 可逆抑制(reversible inhlbition) 抑制剂(大多数毒物)和酶的结合是共价的，不能用一般的物理方法解除抑制而使酶“复活”，必须通过特殊的化学处理才可能将抑制剂从酶分子上移去。 这类抑制不能米-曼氏动力学方程进行分析 2. 不可逆抑制(irreversible inhilItlon) 1. 可逆抑制(reversible inhlbition)： 竞争性抑制： 反竞争性抑制： 非竞争性抑制： I 和 S 结构相似，竞争酶的活性部位，如，丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制。 竞争性抑制可以借助增加底物浓度而解除。 竞争性抑制： I 只能和ES结合，形成IES三元复合体。I 不影响酶与底物的结合，但它阻止IES生成产物。I 倾向于使ES复合体更加稳定。 反竞争性抑制： I 与酶活性部位以外的地方结合，既能与游离酶E结合，也能与ES 结合，并且底物和抑制剂与酶的结合严格地互不干扰，有人称之为纯非竞争性抑制。 纯非竞争性抑制较少遇到，多数情况是E与I的结合和E与S的结合互有影响, 被称为混合型非竞争性抑制或混合型抑制。 非竞争性抑制： (三)可逆抑制作用动力学 1.竞争性抑制 动力学特点：表观Vmax，表观KM 2.非竞争性抑制 动力学特点：表观Vmax，表观KM 3.反竞争性抑制 动力学特点：表观Vmax，表观KM (四) 酶抑制剂应用举例 1.不可逆抑抑制剂 2.可逆抑制剂 有机磷化合物(农药)或有机杀虫剂； 有机汞、有机砷化合物； 氰化物、硫化物、CO； 青霉素 1.不可逆抑抑制剂 有机磷化合物：神经毒剂 结构通式： R1，R2为烃基，如甲基等；X：含F、Cl 的其他集团 肟化物(含-CH=NOH ) 是效解毒剂, 可抢农药救中毒病人。 有机磷化合物作用机制 专一地抑制酯酶，特别是乙酰胆碱酯酶 与酶活性部位中的Ser残基侧链的-OH共价结合 吡啶醛甲碘化物或称解磷定 → 乙酰胆碱将会过分积累→神经系统过于兴奋(中毒)→昆虫死亡。 青霉素： 糖肽转肽酶的不可逆抑制剂 抗菌机制： 自杀底物： 根据酶的催化过程设计的，与底物类似，能与酶结合并被催化，其分子中具潜伏反应基团，当酶对它进行催化时，该基团被暴露或被活化，立即与酶活性部位的必需基团或酶的辅基进行不可逆结合，使酶受抑制。抑制专一性强，经酶催化后引起。 2.可逆抑制剂 磺胺噻唑(ST)： 磺胺嘧啶(SD)： 磺胺类药通式： 最常见的可逆抑制剂，如磺胺类药物对氨基苯磺胺，利用竞争性抑制的原理来设计药物。 植物某些生物碱如毒扁豆碱，胆碱酯酶竞争性抑制剂，含季铵基团，与乙酰胆碱类似，能抑制胆碱酯酶活力。 磺胺类药物的抗菌机制： * 酶促反应动力学 第 10