选修植物生理实验内容..docVIP

实验1植物组织渗透势的测定（质壁分离法）（3课时） [实验目的] 观察植物组织在不同的浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。 [实验原理] 当植物组织细胞的汁液与周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为0时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。这种渗透势相等的溶液称为等渗溶液。 当用一系列浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗溶液将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。代入公式即可以算出其渗透势。 [器材与试剂] 1 实验仪器 显微镜 ，载波片 ，盖玻片，镊子，刀片。 2 实验试剂 100 ml浓度为1mol/L蔗糖溶液:用蒸馏水配成0.10 ,0.15,0.20,0.25,0.30,0.35,0.40,0.45,0.50 mol/L的蔗糖溶液各50ml。 实验材料 洋葱鳞茎或紫鸭跖草。 [实验步骤] 1.取带有色素的洋葱鳞茎或紫鸭跖草下表皮,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,约5-10分钟。 2.从0.50 mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有相同溶液的载玻片上,在低倍镜下观察,如果所有的细胞都产生质壁分离现象,则取低浓度的溶液中的制片做同样的观察,并记录质壁分离的程度。 3.在实验中确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度,和不引起质壁分离的最高浓度。 4在找到上述浓度极限的时候,用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次,直到有把握确定为止.在此条件下,细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。 将结果记录在表中。 在测出引起质壁分离刚开始的蔗糖的最低浓度和不能引起质壁分离的最高浓度的平均值之后,可以按照以下的公式计算在常压下该组织细胞的渗透势 Ψs＝–RTic1 式中：Ψs为细胞渗透势； R为气体常数=0.083×105L?Ρa/mol?Κ; Τ为热力学温度，单位为Κ；即273+t，t为实验温度，单位是0C； i为解离系数，蔗糖为1； c1为等渗溶液的浓度，单位是L/mol。 则 Ψs=-0.083×105×（273+t）×1×c1 [注意事项] 撕下的表皮组织必须完全浸没于溶液中。 实验2种子生活力的快速测定（3课时） [实验目的] 熟悉种子生活力快速测定的各种方法。 I氯化三苯基四氮唑法（TTC法） TTC试剂为氧化态，无色，TTC还原后为红色的三苯基甲月替（TTF）。该法是利用活细胞进行呼吸时，可产生还原性物质，如：NADH、NADPH等。 [实验原理] 凡有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生命活力的种胚则无此反应。当TTC渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH或NADPH）上的氢还原时，便有无色TTC变为红色的TTF。反应式详见实验2-7-II。 [器材与试剂] 1.实验仪器 恒温箱，天平，烧杯，培养皿，镊子，刀片。 2.实验试剂 0.5% TTC溶液（称取0.5克TTC放在烧杯中，加入少许95%乙醇使其溶解，然后用蒸馏水稀释至100ml。溶液避光保存，若变红色，即不能再用。 3.实验材料 大麦，小麦，籼谷或粳谷的种子。 [实验步骤] 1.浸种 将待测种子在30-350C温水中浸种（大麦、小麦、籼谷6-8小时，玉米5小时，粳谷2小时），以增强种胚的呼吸强度，使显色迅速。 2.显色 取吸胀的种子200粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为二半，将其中的一半置于2只培养皿中，每皿100个半粒，加入适量的0.5% TTC溶液，以覆盖种子为度。然后置于300C恒温箱中0.5-1小时。观察结果，凡胚被染成红色的是活种子。将另一半在沸水中煮5分钟杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。 3.计算活种子的比例。 II麝香草酚蓝法（BTB法） BTB是一种酸碱指示剂，pH6.0-7.6酸黄，碱蓝，中间（pH 7.1）经过绿色。该法是利用活细胞呼吸产生二氧化碳，二氧化碳进入培养基可改变pH，BTB发生颜色变化，判断种子的活了。 [实验原理] 凡活细胞必有呼吸作用，吸收空气中的O2，放出CO2。CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离成H+和H2CO3－，使得种胚周围环境的酸度增加，可用溴麝香草酚蓝法（BTB法）来测定酸度的改变。BTB的变色范围为pH6.0-7.6，酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为pH7.1）。色泽差异显著，易于观察。 [器材与试剂] 1.实验仪器　恒温箱，天平，培养皿，烧杯，镊子，漏斗，滤纸，琼脂。 2.实验试剂　0.1％BTB溶液［称取BTB0.1g，溶解于100ml煮沸过的自来水中（配置指示剂的水应为微酸性，使溶液呈蓝色或蓝绿色，蒸馏水为微酸性不宜用），然后用滤纸滤去残渣。滤液若成黄色，