高中生物选修一《生物技术实践》导学案..doc

2.1.1　微生物的实验室培养　导学案 〖学习要求〗认识培养基的成分、类型和应用；认识无菌操作技术的基本要领 【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论，完成下列问题，并初步巩固。 一、基础知识： 【活动１】阅读教材“课题背景”和“培养基”部分，讨论并回答下列问题： 1．（记忆）培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。 2．（记忆）琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。 【开拓视野1】培养基的类型（记忆）及其应用 分类标准 培养基类型 配制特点 主要应用 物理性质 固体培养基 加入琼脂较多 菌种分离、鉴定、计数 半固体培养基 加入琼脂较少 菌种保存 液体培养基 不加入琼脂 工业生产的连续培养 化学组成 合成培养基 由已知化学成分配制而成，培养基成分明确 菌种分类、鉴定 天然培养基 由天然成分配制而成，培养基成分不明确 用于工业生产降低成本 目的用途 鉴别培养基 添加某种指示剂或化学药剂 菌种的鉴别 选择培养基 添加（或缺少）某种化学成分 菌种的分离 3．（了解）阅读教材“附录3”，认识各种培养基的用途（填表）。 培养基名称 应用 培养基名称 应用 牛肉膏蛋白胨培养基 培养细菌 查氏培养基 培养霉菌 营养琼脂培养基 培养细菌 MY培养基 霉菌和酵母菌传代保藏 麦芽汁琼脂培养基 培养酵母菌 尹红美蓝培养基 检测水中大肠杆菌含量 马铃薯琼脂培养基 培养真菌 MS培养基 用于植物组织培养 4．（记忆）培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。此外，培养基还要满足微生物生长的pH、特殊营养物质和氧气等要求。 【开拓视野2】（记忆）有机营养成分及其作用 碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等含碳有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。 氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。 生长因子：某些微生物正常生长代谢中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。 其中，含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。 【思考1】牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。 【思考2】培养乳酸杆菌时需要添加维生素；培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性； 培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。 【活动２】阅读教材“无菌技术”部分，讨论并回答下列问题： 1．（记忆）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。 2．（记忆）无菌技术包括：对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。 3．（理解）比较消毒和灭菌（填表） 比较项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 部分生活状态的微生物 不能 灭菌 强烈 全部微生物 能 【思考3】无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是防止感染实验操作者。 【活动３】阅读教材“实验室常用的消毒和灭菌方法”，讨论并回答下列问题： 1．（了解）消毒方法：生活经常用到的是煮沸消毒法；对一些不耐高温的液体则用巴氏消毒法；对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液，然后使用紫外线进行物理消毒；实验者的双手使用酒精进行消毒；饮水水源用氯气进行消毒；肌肉注射时所用的皮肤消毒剂有酒精、碘酒；皮肤擦伤后所用的消毒剂有结晶紫、红汞、H2O2等。 2．（记忆）灭菌方法：接种环、接种针、试管口等用灼烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；培养基、无菌水等用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。 3．（记忆）对接种环灭菌时要是用酒精灯的充分燃烧层火焰灼烧可能深入试管的部位。 4．（记忆）利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能太挤，目的是避免妨碍热空气流通。 5．（掌握）高压蒸汽灭菌法：物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内的冷空气，目的是有利于锅内温度升高；随后关闭排气阀继续加热，气压升至100kPa，温度为121℃，并维持15～30min；切断热源使温度自然降温，气压务必降至零时打开锅盖，其目的是防止容器中的液体暴沸。 【活动４】观看视频：观看有关灭菌操作的视频，理解并学会相应的技术和方法。 〖课后学习〗 1．尝试利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。 2．基础训练册：将基础知识整理到作业本上；完成该节训练题。 2.1.2　微生物的实验室培养　导学案 〖学习要求〗学会培养基的配制；进行大肠杆菌的纯化培养。 【预习指导