神经生物学实验..docxVIP

实验一 反射时的测定及反射弧的分析 [目的] 1．学习测定反射时的方法。 2．了解反射弧的组成。通过实验证明任何一个反射，只有当实现该反射的反射弧存在，并保证其完整的情况下才能出现。[原理]机体在中枢神经系统参与之下，对刺激所发生的反应叫做反射；反射弧是反射的解剖学基础(反射弧一般包括感受器、传入神经、中枢、传出神经、效应器等五个部分)。要引起反射，首要条件是反射弧必须完整。反射弧的任何一部分受到破坏，反射即不出现。[实验动物] 蛙或蟾蜍[器材及药品] 蛙类常用手术器械、支柱台、蛙嘴夹、蛙板、蛙腿夹、小烧杯、大烧杯、培养皿玻璃 (2个)、小滤纸片、棉花、秒表、纱布、0.5％及1％硫酸溶液、水。[方法与步骤] 一、脊蟾蜍的反射1．制备脊蛙（或脊蟾蜍）：利用毁髓针从枕骨大孔处捣毁脑，保留脊髓制备脊蛙，用蛙嘴夹夹住蛙的下颌，挂在支柱台上2. 屈曲反射正常反射活动的观察及反射时的测定：用培养皿盛0. 5％硫酸溶液，将蛙右后肢的最长趾浸入0.5%硫酸溶液中2～3mm ( 浸入时间最长不超过10s )，立即记下时间（以秒计算）。当出现屈腿反射时，则停止计时，此为屈腿反射时（即从浸入时起至后肢发生屈曲时所需要的时间）。立即用清水冲洗受刺激的皮肤，并用纱布擦干。重复三次，求出平均值作为右后肢最长趾的反射时。用同样方法测定左后肢最长趾的反射时。3. 搔扒反射用浸有1%硫酸的滤纸片刺激脊蟾蜍一侧胸腹部或背部皮肤，引起同侧或双侧后肢运动，扒掉滤纸片。二、反射弧1、反射弧模式图2、屈曲反射的反射弧最长趾感受器→传入神经纤维→脊髓→传出神经纤维→下肢屈肌3、搔扒反射的反射弧腹部感受器→传入神经纤维→脊髓→传出神经纤维→下肢肌三、反射弧完整才能发生反射1、破坏感受器手术剪自右后肢最长趾基部环切皮肤，然后再用手术镊剥净长趾上的皮肤。用硫酸刺激去皮的长趾，记录结果。2、麻醉传入和传出神经纤维沿右后肢的股二头肌沟剪开皮肤，分离出坐骨神经。在神经下穿细棉线后，在细棉条上滴几滴2％普鲁卡因溶液，每隔2min重复刺激 (记录加药时间)。当屈反射刚刚不能出现时(记录时间)，大约五分钟后，用浸有1%硫酸的滤纸片刺激脊蟾蜍一侧胸腹部皮肤，观察搔扒反射。然后15分钟后，再用滤纸片刺激胸腹部皮肤，观察搔扒反射。 3、破坏效应器将蟾蜍一侧皮肤从根部环切，剥离后浸入含20%的甘油任氏液中，大约经过三十分钟后，该侧肢体不能发生搔扒反射4. 破坏脊髓中枢用细探针插入髓管内，上下抽动破坏中枢——脊髓，蛙四肢松弛。重复实验，记录结果。四、小结1、反射是机体通过神经系统对内外环境的刺激所发生的反应2、反射弧是反射的结构基础，由感受器、传入神经纤维、传出神经纤维、效应器组成。3、反射的完成依赖反射弧的完整性。[讨论]1. 说明屈腿反射的具体过程。 2. 以实验结果为根据，以严密的逻辑推理方式说明反射弧的几个组成部分。[注意事项]每次实验时，要使皮肤接触硫酸面积不变，以保持相同的刺激强度刺激后要立即洗去硫酸，以免损伤皮肤。实验二 坐骨神经腓肠肌标本制备【实验原理与目的】蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握。因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋和兴奋性、刺激与肌肉收缩等基本生理现象和过程。所制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验中必须掌握的一项基本技能。本实验目的在于学习破坏蛙类脑脊髓法，掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备技术、并获得兴奋性良好的标本，为以后有关实验打下基础。【实验对象】蛙或蟾蜍。【实验器材和药品】?1．器械?蛙类动物手术器械一套，包括普通剪刀、小手术剪刀、镊子、探针、锌铜弓、玻璃分针、蛙板、玻璃板、固定针等。2．药品?任氏液。3．其它?瓷盘、培养皿、小烧杯、棉花、棉线、纱布、滴管等。【实验步骤和观察指标】1.破坏脑和脊髓?取蟾蜍一只，用布包裹蟾蜍四肢躯干露出头部，用左手握住蟾蜍，并用食指按压头部前端，拇指按压背部，使头部前俯；右手持金属探针由头前端沿中线向尾方划触、触及凹陷处即枕骨大孔的所在。将探针由凹陷处垂直刺入，刺破皮肤即入枕骨大孔，这时将探针尖端转向头方，向前探入颅腔内，然后向各方搅动探针，以捣毁脑组织。如探针确在颅腔内，术者可感觉出针在四面皆壁的腔内。脑组织捣毁后，将探针退出；再由枕骨大孔刺入，并转向尾方，与脊髓平行刺入脊管，以破坏脊髓。脑和脊髓是否完全破坏，可检查动物四肢肌肉的紧张性是否完全消失。拔出探针后，同一干棉球压迫针孔，以止其出血（见图3-1-1-1）。另一方法是去脑后再捣毁脊髓。2.剪除躯干上部及内脏?在骶髂关节水平以上0.5~1cm处剪断脊柱。左手握止蟾蜍后肢、用拇指压止骶骨，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持粗剪刀（非手术剪），沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以