生物膜的保护剂海藻糖在冻干红细胞中的应用.docVIP

生物膜的保护剂海藻糖在冻干红细胞中的应用 【摘要】 海藻糖作为一种稳定的非还原性双糖，在细胞冷冻、干燥、冻干过程中对细胞活性有着良好的保护作用并已广泛应用于人血细胞的冻干。海藻糖以其异常的水合能力、独特的玻璃化转换和晶体转变行为及抗高温潮湿的特性受到密切关注，并成为细胞保存研究中首选的一种保护剂。海藻糖对细胞的保护机制、海藻糖导入哺乳细胞的实验方法以及红细胞对海藻糖负载的可能作用机制都是近几年细胞保存研究的热点，本文就以上几方面的进展详细进行论述。 【关键词】 生物膜保护剂；海藻糖； 冻干保存； 红细胞 　　Trehalose —A Biomembrane Protectant Applyied to Lyophilization of Human Red Blood Cells——Review 　　AbstractTrehalose, as a nonreducing disaccharide, plays a role in protecting the cytoactivity when the cells is freezing, drying or lyophilization. It has been a biomembrane protectant applied to lyophilization of human blood cells (platelets and erythrocytes), and from which astonishing results have been obtained. Having powerful hydration, distinctive vitrification transform and crystal transform and unique resistance of high temperature and humidification, trehalose is thought of a preferred protectant in the study of cell preservation. In recent years, people concerned trehalose on its protective mechanism, experimental means of transit trehalose to mammal cells and the mechanism of loading in red blood cells. The above aspects were briefly summarized in this article. 　　Key wordstrehalose； vitrification； lyophilization； erythocyte 　　海藻糖作为一种稳定的非还原性双糖，在一些微生物、低湿休眠脊椎动物和更苏植物中有较高的浓度。当这些生物处于干燥脱水或高渗环境时，海藻糖可以在细胞膜外形成一种玻璃状的防护层，提高了细胞的渗透压耐受性或耐干燥性，从而在干燥状态下保护生物体细胞内的蛋白质、脂类、糖类、核酸等组分不受破坏，使细胞继续保持活性［1］。鉴于海藻糖对低等生物细胞具有这种特殊的保护作用，人们开始尝试探索海藻糖是否对高级哺乳动物细胞也有类似的作用，研究发现海藻糖对一些体细胞，如胰岛内分泌细胞［2］和成纤维细胞［3，4］都有不同程度的保护作用。近几年，人们将海藻糖应用于人类血细胞的冷冻保存或冻干保存中。Pellerin-Mendes等［5］在采用不同浓度的海藻糖冷冻保存红细胞的研究中发现，红细胞在1 mol/L海藻糖溶液中深低温保存后细胞回收率达到81％，上清液游离血红蛋白的浓度仅为0.4 g/L，和传统的甘油冷冻法获得的结果无明显差异。Wolkers等［6］已经成功地将海藻糖导入人血小板的胞质内，其机制可能是温度介导的细胞内吞作用。实验结果显示，负载海藻糖的血小板经冻干后，其存活率大约为90％，复水后存活的血小板功能全都恢复，且已用于动物实验。 　　海藻糖的独特性质 　　很多学者在比较了海藻糖与其他一些小分子量糖类之后，发现海藻糖具有其特有的物理和化学性质，而正是这些特有的性质使其具有特有的保护作用。 　　海藻糖的异常水合能力 　　Kawaai等［7］的研究表明，在已研究的二糖中，海藻糖周围的不冻水分子数最大，如果以每个葡萄糖单位周围的不冻水分子数计算，海藻糖的不冻水分子是糖类最多的。Magazu等［8］比较了海藻糖/水和蔗糖/水在玻璃化相转变附近的振动性质，认为海藻糖/水具有更刚性的结构，也就是说，它能把细