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辛麻止咳颗粒中马兜铃酸的含量测定研究 【摘要】 目的控制辛麻止咳颗粒中马兜铃酸的含量。方法采用高效液相色谱法建立了辛麻止咳颗粒中马兜铃酸的含量测定方法。结果该方法灵敏度高。准确可靠，可以作为辛麻止咳颗粒中马兜铃酸的质控方法。结论 该品中不含马兜铃酸。 【关键词】 辛麻止咳颗粒 细辛 马兜铃酸 高效液相色谱法 　　Abstract：ObjectiveTo control the quantity of aristolochic acid in Xinmazhike Granules. Methods HPLC was used to determine the content of aristolochic acid in Xinmazhike Granules. Results The method could be used to control the quantity of aristolochic acid in Xinmazhike Granules. Conclusion There is no aristolochic acid in Xinmazhike Granules. 　　Key words：Xinmazhike Granules; Herba Asari; Aristolochic acid; HPLC 辛麻止咳颗粒是由细辛、麻黄等组成的复方颗粒剂。功能祛风散寒，宣肺止咳。用于急性支气管炎，即风寒袭肺、肺失宣畅所引起的咳嗽。方中细辛为马兜铃科植物北细辛Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var.mandshuricum(Maxim.) Kitag. ，汉城细辛Asarum sieboldii Miq. var. seoulense Nakai或华细辛Asarum sieboldii Miq.的干燥全草。马兜铃科中其他数种药材被检测出马兜铃酸，马兜铃酸是硝基菲羧酸，主要含有马兜铃酸I（AAI），马兜铃酸II（AAII）。现代研究表明，马兜铃酸具有肾毒性作用，表现为急性马兜铃肾病、慢性马兜铃肾病、肾小管功能障碍马兜铃肾病［1］。细辛中是否含有马兜铃酸仅有报道持怀疑观点，因此我们对本品中的马兜铃酸进行了检测研究。 　　1 器材 Agilent1100高效液相色谱仪，UV-1206紫外分光光度计（日本岛津制作所）。辛麻止咳颗粒自制。马兜铃酸A对照品购自中国药品生物制品检定所（批号110746-200204，用峰面积归一化法测定并计算，结果含量为96.361%）。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件　 　　用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－3.3%醋酸（61∶39）为流动相；检测波长为250 nm。进样量为10 μl。理论板数按马兜铃酸A峰计算应不低于3 000。 　　2.2 供试品的制备　 　　取本品5 g，精密称定，加甲醇120 ml，索氏提取4 h，浓缩提取液，并转移至25 ml量瓶，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm的微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。 　　2.3 对照品的制备　 　　取马兜铃酸A对照品，加甲醇稀释制成每毫升约含0.2 μg的溶液，即得。 　　2.4 阴性对照品的制备　 　　取不含细辛的其余药材，按工艺制备阴性浸膏，加入适量辅料，制成空白颗粒。取适量，按“供试品的制备”项下方法制备，即得。 　　2.5 方法学研究 　　2.5.1 检测波长的选择取马兜铃酸A对照品，用甲醇稀释制成每毫升约含10.00 μg的溶液，在220～400 nm的波长处进行扫描，经测定本品在223，250，317，388 nm处有最大吸收。250 nm波长下本品给出的色谱信息要比其它波长多，参考文献［2～4］中也多选用250 nm，因此选250 nm作为检测波长。 　　2.5.2 线性关系考察取马兜铃酸A对照品，用甲醇稀释制成每毫升含1 μg的溶液作为对照品溶液，分别精密吸取对照品溶液6，8，10，12，14 μl加甲醇稀释至25 ml，摇匀，滤过。分别精密吸取上述对照品溶液10 μl注入色谱仪，记录色谱图，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，结果表明，马兜铃酸A在0.141 92～0.447 36 μg/ml范围内，呈良好的线性关系（r＝0.999 8）。 　　2.5.3 重复性实验取本品5份各约5 g，照供试品制备项下方法制备，依法测定，结果均未检出，表明该方法重复性良好。 　　2.5.4 精密度考察　 　　取对照品溶液重复进样6次，记录峰面积，计算，结果RSD为2.27%，该方法精密度良好