7第七章 发酵过程控制3精品课件.pptVIP

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(3)尾气氧的仪器分析 采用热磁氧分析仪测定 原理是氧具有高顺磁性。在磁场中,氧气的磁化率比其它气体高几百倍,故混合气体的磁化率几乎完全取决于含氧气的多少。将排气通入热磁氧分析仪,就可测出排气氧的含量。 通过RQ值的测定,可以分析微生物可能利用的基质——氧化型的或还原型的,分析微生物生长阶段,分析补料的速率是否合理 例如,储炬等发现RQ的变化与菌体生长、营养状况以及产生抗生素密切相关。如20h菌丝开始发生膨大,而此时RQ达到峰值开始下降;40h左右RQ降至谷底开始回升,正是在这段时间产生抗生素启动。由于RQ具有以上的关联特性,他们尝试在avemectin发酵过程中利用RQ作为补料控制的参考之一。 3、排气氧、排气CO2和呼吸熵 酶电极与气敏电极相似,是在离子选择性电极的表面覆盖一个涂层,把酶固定在涂层内,通过酶反应产生的物质的测定,可以推算出反应物的量。 例如脲酶电极,把脲酶固定在NH3气敏电极或CO2气敏电极的表面,在脲酶的催化下,尿素可以发生如下的分解反应: CO(NH2)2+H2O 2NH3+CO2 通过NH3或CO2气敏电极测定NH3或CO2的分压即可达到间接测定尿素的目的。 4、酶电极 (三) 溶氧的测定 对于好氧微生物来说氧的供应十分重要,了解发酵过程中溶氧情况是发酵控制的关键方面。现在发酵中溶氧测定大多用溶氧电极来测定。溶氧电极可分为极谱型和原电池型。 极谱型 需极化电压及放大器,耗氧少,受气流影响小 原电池型 简单便宜,适于中小罐。耗氧较大,受气流和气泡影响大。 现在国内外测定溶液中的溶解氧基本上用极谱型的复膜氧电极。 复膜氧电极可分为 敞口式 封闭式 敞口式 在电极的玻璃管上有一个小孔,使玻璃管与环境相通,这样在蒸汽灭菌时电极玻璃管内外压力相等,有利于保护电极 封闭式的电极玻璃管上没有小孔,蒸汽灭菌时玻璃管受压大 现在使用的大多数是敞口式电极 1、复膜氧电极的工作原理 阴极由铂、银、金等贵金属组成,阳极由铅、锡、铝等组成 。当给电极施加极谱电压(0.6~0.8V负电压)时,溶液中的氧就在阴极被还原。当产生的电流与溶液中氧含量成正比时,此时的电极电流为饱和电流,此时的电压为极谱电压。氧浓度与饱和电流成正比关系。 在阴极表面发生的电极反应: 1/2O2+H2O+e- 2OH- 阴极上失去电子后,阳极反应产生的电子流向阴极,于是在二电极之间形成电流,将氧的信号转变成电信号。氧浓度越高,电流越大。 阳极上的反应是: Pb+2ACO- Pb(ACO)2+2e- 化学信号转变成电信号 2、电极的构造 在阴极银(铂)片的前面包一张半透膜,氧可以透过半透膜达到阴极上进行电极反应。该半透膜固定在阴极表面。小孔用于压力补偿。 3、溶氧电极的影响因素 (1)电极的灵敏度 电极的阴极表面覆盖了半透膜之后,在一定条件下当膜成为氧扩散的控制因素时,氧分压的变化与电流输出的稳态有以下对应式: IS=NFA(pm/dm)pO2 式中IS——电极电流 N——电子数 F——法拉第常数 A——阴极表面积 Pm——氧在复膜中的穿透系数 PO2——被测溶液中的氧分压 dm——膜的厚度 增加灵敏度因素: 增加膜穿透系数pm 减小膜厚度dm 增加阴极表面积A 扩散速度 因为电极表面的氧浓度与液体主流中的氧浓度存在浓度梯度 搅拌速度、通气量和培养液粘度 (2)温度的影响 电极还会受温度的影响 氧在溶液中的溶解度随温度上升而下降 温度上升使膜穿透系数增加,且氧的内相扩散增加,增加了电化学反应速率。 由于后者影响比较显著,因此随着温度的上升,电极输出电流呈指数上升。所以电极须有温度补偿功能,才能真正反映出氧溶解度变化的情况。 4、电极的标定 一般测定中应进行以下二点标定 (1)零点标定 用饱和Na2SO3作无氧状态的溶液,将氧电极放入该溶液中,显示仪表上可见溶氧浓度下降,待下降稳定后,调节零点旋钮显示零值。 (2)饱和校正(满刻度) 进行简便测定时,可以采取空气饱和方式。将电极放入培养液中,通气搅拌一段时间,显示仪上可见溶氧上升,待上升稳定,调节满刻度旋钮至100%即为饱和值。 5.摄氧率r的测定 (1)用溶氧电极测定r 要求电极响应时间短,能跟上摄氧率的变化。测定前先用纯水标定电极,得到单位电流代表的溶氧浓度: I饱——在饱和氧浓度C*时的电流值 I残——氧浓度为零时电极所具有的电流 若测定某培养时间的摄氧率,则关闭通气阀,保持搅拌,在罐顶通氮气,赶走上面的空气。此时,由于耗氧,CL下降,仪表上电流值也不断下降。 R=

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