(分离名词解释.docVIP

10 ?蛋白质复性 包含体（inclusion body) ?重组蛋白质的高表达常常导致其在细胞内发生错误折叠和聚集，形成被成为包含体的聚集体。 包含体主要由蛋白质构成，其中大部分是基因表达产物，这些基因表达产物的一级结构是正确的，但立体结构是错误的，没有生物活性。 ? 以包含体形式表达的蛋白质，需要在回收后溶解，使其肽链伸展（unfolding)，然后在合适的溶液环境下使目标蛋白质恢复天然构型和生物活性。这一过程称为蛋白质的体外再折叠（refolding）或复性（renaturation）。10.1.1 ?包含体的形成 氨基酸顺序决定了蛋白质的立体结构。理论上蛋白质折叠成天然活性状态是自发完成的，但伸展的肽链折叠成立体结构的过程受周围环境的影响。 包含体是在表达产物翻译后立即形成，包含体内的表达产物具有部分二级结构。 一般认为包含体的形成是部分折叠的中间态（intermediates)之间疏水性相互作用的结果，主要原因是蛋白质本身具有易于聚集沉淀的性质，或表达产物周围的物理环境（如温度、离子组成）不适或缺少某些折叠辅助因子（如分子伴侣）的作用。 ? 在大多数情况下，包含体的形成是蛋白质过量表达的结果，而与蛋白质种类和表达系统无关。 对于任何蛋白质和任何表达系统，在过量表达的情况下都可能形成包含体。 ? 活性产物N的形成为分子内折叠反应，折叠速率与浓度成正比；聚集体A的形成反应在