(噻吩相关物质方法学参考.docxVIP

头孢曲松：有关物质测定方法2010版《中国药典》二部头头孢曲松质量标准中有关物质检查的规定如下：取本品，加流动相A-流动相B(7:93)溶解并稀释成每1ml约含头孢他啶1.2mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相A-流动相B(7:93)稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照高效液相色谱法测定（附录ⅤD）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为乙腈 ，流动相B为磷酸盐缓冲溶液（取磷酸二氢铵22.6 g加水溶解并稀释至1000ml，用10 %的磷酸溶液调节pH值至3.9），按下表进行线性梯度洗脱。柱温为35℃；检测波长为255nm。取头孢他啶对照品60mg，置50ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液5ml溶解，用水稀释至刻度，摇匀。在沸水浴中放置20分钟，取出，放冷，作为系统适用性试验溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。理论板数按头孢他啶峰计算不低于3000，头孢他啶与其前相邻杂质峰的分离度应不小于1.5。取对照溶液20 μ l注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的25％。精密量取供试品溶液和对照溶液各20 μ l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍（0.5%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍（2.0%），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.05倍的杂质峰面积可忽略不计。 保留时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0793147932914864014864179352793对上述有关物质检查方法进行了系统的方法学验证研究。研究结果总结见下表，具体研究内容如下表3.2.S.4-7：表3.2.S.4-7 有关物质测定方法学验证总结项目验证结果专属性系统适用性结果表明头孢他啶峰理论板数及与其前相邻峰分离度均符合要求；采用流动相配制供试品液溶，无干扰色谱峰；在强热、强酸、强碱、氧化和光照作用下，头孢他啶均不稳定，可产生数个分解产物；在上述液相色谱条件下，各分解产物峰均可与头孢他啶主峰分离良好，相互之间也能获得良好分离；起始原辅料（TAEM,7-ACA）及中间体（7-APCA,头孢他啶叔丁基酯）与主峰头孢他啶的分离度良好，均大于1.5。故采用该色谱条件进行有关物质检查专属性良好。线性范围不适用定量限定量限为123.33ng/ml检测限最低检测限为41.11ng/ml准确度不适用精密度不适用杂质归属采用该方法对CP2010中规定的杂质A和混合杂质进行了定性检查，并且能和强制破坏获得的某些杂质峰相对应。起始原辅料（7-ACA,TTA）及中间体（7-ACT）也进行了定位，结果可见各杂质可以良好分离和检测，并且对杂质进行了归属。溶液稳定性无相关研究耐用性无相关研究与原研产品杂质的对比3批中试样品和原研产品及国内上市厂家的杂质基本一致I 有关物质测定方法仪器Agilent1260 LC-10AT VP型高压输液泵 Agilent1260 SPD-10A VP型紫外检测器 Agilent1260 EZ-Chrom色谱工作站 色谱条件色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱(Agela, 4.6×250mm )流动相：A-乙腈: B-磷酸盐缓冲液（22.6g/L磷酸二氢铵溶液，用10%磷酸溶液调pH值至3.9），按下表进行梯度洗脱。时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0793147932914864014864179352793 检测波长：255nm；柱温：35℃。 进样量：20μl 测定法取本品，加流动相A-流动相B（7:93）溶解并稀释制成每1ml中约含头孢他啶1.2mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相A-流动相B（7:93）稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取头孢他啶对照品60mg，置50ml量瓶中，加入0.1mol/L盐酸溶液5ml溶解，用水稀释到刻度，摇匀。在沸水浴中放置20分钟，取出，放冷，作为系统适用性试验溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。理论板数按头孢他啶峰计算不低于3000，头孢他啶与其前相邻杂质峰的分离度应不小于1.5。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分的峰高约为满量程的25%。精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得超过对照溶液主峰面积的0.5倍（0.5 %），杂质峰面积总和不得超过对照溶液主峰面积的2倍（2.0 %），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.05倍的杂质峰可忽略不计。II 专属性考察 系统适用性 取头孢他啶对照品60mg，置50ml量瓶中，加入0.1mol/L盐酸溶液5ml溶解，用水稀