(酶工程重点考试.docVIP

1.酶作用专一性机理 专一性：一种酶只能作用于一种或一类底物。表现为 锁钥模型 认为整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的，酶活性部位的形状与所需作用的底物形状相吻合，它们可以象钥匙与锁一样互相匹配。此学说可以较好的解释酶的立体异构专一性；但不能解释酶的多底物现象、酶对正反方向的催化等 诱导契合模型 该学说认为酶的活性部位并不是和底物的形状正好互补的，而是在酶和底物结合的过程中，由于酶与底物相互诱导，使底物分子或酶分子，有时是两者的构象同时发生了一定的变化后才互补的，这个动态的辨认过程称为诱导契合。 2.抑制作用：通过与酶分子上的某些必需基团结合，使这些基团的结构和性质发生改变，从而引起酶活力下降或丧失，这种作用称为抑制作用。 3.别构效应：调节物与酶分子的调节中心结合之后，引起酶分子构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力。 4.酶活力：也称酶活性，指酶催化一定化学反应的能力。其大小可用在一定条件下，它所催化的某一化学反应的反应速率来表示，两者呈线性关系。所以测定酶的活力就是测定酶的反应速率 酶反应速率：用单位时间内、单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示。单位：浓度/单位时间 5.酶的比活力:代表酶的纯度，用每mg蛋白质所含的酶活力单位数表示，对同一酶来说，比活力愈大，表示酶的纯度愈高。 6. 细胞的破碎的方法:机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法、酶促破碎法 7.制备固定化酶的方法很多，有包埋法，吸附法，共价键结合法，以及交联法等 9.酶化学修饰的方法 酶分子内部化学修饰1、肽链有限水解修饰2、氨基酸置换修饰3、金属离子置换修饰 酶分子表面化学修饰4、酶分子侧链基团的修饰5、大分子结合修饰6、化学固定修饰 10.同工酶指具有同一底物专一性，并能催化同一种化学反应，但分子结构与理化性质不完全相同的一组酶 判断题 酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。 （ ╳） 酶的分类与命名的基础是酶的专一性。 （√ ） 酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。 （√） 液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。 （√） 培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。 （╳） 膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。 （√） 在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。 （√） 角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。 （╳） α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。 （╳） 酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。 （╳） 1. 酶的纯度可以用考马斯亮蓝法测定。 × 2. 无论是哪种抑制方式存在，酶促反应的最大反应速度都将下降。 × 3. 固定化酶技术就是通过某种方式将酶固定于固体载体上从而限制 其移动的一项技术。√ 4. 固定化酶的活力一般比天然酶的活力低。√ 5. 固定化可以导致被固定的酶的最适pH值发生变化。 √ 6. 固定化酶的表观米氏常数Km值随载体的带电性能变化.当酶结合 于中性载体时,由于扩散限制造成表观Km值的上升。√ 7. 共价结合法固定化酶首选用于固定化的氨基酸残基主要是酶的必 需氨基酸。× 8. 交联法固定化酶是一种非共价的固定化方式。× 9. 当修饰发生在远离活性部位的氨基酸上，则蛋白质活性丧失的程度 一定与修饰程度呈某种可计量相关关系。 × 10. 在消除抗原性和保持酶的活性方面，大分子表面化学修饰远远优于 小分子化学修饰。√ 11. 在非水介质中水的存在是酶维持活性的关键，因此在非水介质中应 尽量增加含水的比例 12. 酶在有机介质中活性一定会下降。× 13. 在一定的条件下，酶在有机溶剂中能够保持其蛋白质三维结构和活 性中心的完整性。√ 14. 至今自然界中未发现天然的脱氧核酶。 √ 15. 根据定义：酶活力是指酶催化一定化学反应的能力。一般来说，测 定酶活力时，测定产物生成量比测定底物减少量更准确。× 单选题 模拟酶的主要基础理论是：稳定过渡态理论 简答题 固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？ 优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺（2）可以在较长的时间内连续使用（3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化 （4）提高了酶的稳定性（5）较能适于多酶反应（6）酶的使用效率高 产率高 成本低 缺点：固定化时酶的活力有损失；比较适应于水溶性底物；与完整的细胞相比，不适于多酶反应。 酶分子的改造措施 3微生物发酵产酶 酶发酵生产的菌株一般需具备什么条件。 不是致病菌，在系统发育上最好是与病原体无关