植精典课件物组织培养---绪论PPT.ppt

 第一章 绪 论 一、植物组织培养的概念 (一) 概 念 植物组织培养（Plant tissue culture）广义上是指无菌条件下，在特定的培养基上对离体的植物器官、组织、细胞和原生质体甚至包括完整植株进行培养的技术。 上述阶段仅是探索，没有实质上进展，主要受当时理论水平、科研和设备条件的限制，未诱导出完整植株。 1933 李继侗、沈同用银杏胚乳提取物培养银杏胚→获得成功，（获得3mm以上大小的胚，即可正常生长成小植株）并发现胚乳提取物能促进银杏离体胚的生长，为后人利用植物组织提取液促进培养物生长提供了实验根据。这是首次利用天然提取物。 1934年，美国的White（怀特）用无机盐、糖类和酵母抽提物的培养基进行番茄根尖切段培养，建立了第一个活跃生长的无性繁殖系。无机盐、三种B族维生素、取代酵母浸出液（1934→1968）继代1600代后仍能正常生长。 1943年，white出版了第一本专著《植物组织培养手册》《A Hand Book of Plant Tissue Culture》。 三、植物组织培养技术的应用 1、优质种苗的快速无性繁殖： （1）无性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖 体胚液体培养 不同类型液体培养装置 液体培养体系 菠萝种苗液体培养系统 丹参毛状根培养 器官培养 胚胎培养 组织培养 细胞培养 原生质体培养 液体培养 固体培养 按培养材料 按培养方式 培养类型 分类属性 二、? 植物组织培养发展简史 1、理论准备阶段（探索阶段）（20世纪30年代前） ①1667年，虎克（R. Hooke）发现细胞；1756年，Duhamel发现了愈伤组织形成。 ②1838—1839， Schleiden(1838施莱登提出植物细胞学说) 和 Schwann（1839年施旺认为细胞学说也适用于动物）创立了细胞学说。 ③1902年德国的Haberlandt(哈布兰特)：“植物离体细胞培养试验”。提出了高等植物的器官和组织可以不断分割、直至单个细胞，并大胆提出在试管培育植物，预言离体细胞在生理、发育上有潜在的全能性。 即：所有植物的细胞在适当的条件下具有不断分裂和繁殖并发育成独立个体，可增殖，具有分化为完整植株的潜在能力。Cell有全部遗传信息和发育成完整植株的能力，但处于完整植株的生活细胞受整体Cell控制（即gene受阻or other发挥作用），完整植株上Cell细胞只表达一定形态生理功能。 2、发展时期（奠基阶段，30年代中至50年代末） 组培的真正建立和发展，从1934年开始才算有了突破。 1945年F.Skoog和崔澄发现腺嘌呤促细胞分裂、组织成芽。Skoog和催澄在烟草茎段和髓培养以及器官形成的研究中发现，腺嘌呤或腺苷可以解除生长素（IAA）对芽形成的抑制作用，而诱导形成芽。 1956年 Miller发现了激动素（Kinetion）其效果为腺嘌呤的3万倍。 1957 Skoog和Miller提出有关植物激素控制器官形成的概念 细胞分裂素 茎 生长素 根 1958 Reiner and Steward，从胡萝卜愈伤组织和细胞培养中，诱导分化产生了体细胞胚，这是人类第一次实现了人工体细胞胚，并获得个体植株。使Haberlandt愿望突现了，科学证明了全能性理论。 在此阶段，White等的工作建立了植物组织培养的综合培养基，它包括无机盐、有机成分和生长刺激因素，同时建立了植物组织培养的基本方法，成为当今植物组织培养的技术基础。 成功原因： 〈1〉植物生长调节物质的应用，突现了对离体细胞生长和分化的控制 〈2〉B族V生素对植物细胞生长的重要性认识和采用（1934，white） 〈3〉由White和Gautheret发展的基本方法 3 快速发展阶段（60年代以来） 可概括为以下四个方面： （1）基础研究领域成绩显著： 1962 Murashige Skoog 在烟草培养中筛选出卓有成效的MS培养基。 1965 Vasil Hildebrandt 由分离培养的烟草单细胞成功培育出完整再生植株。从细胞水平证实了植物细胞具有全能性。 （2）原生质体培养取得突破： 1971 Takebe 在烟草上首次由原生质体获得了再生植株。再次证实植物细胞的全能性。原生质体培养为外源基因的导入提供了理想的受体，促进了体细胞融合技术的发