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组织分布 组织分布的研究内容 一.研究组织分布的意义 二.组织分布的研究方法 三.研究实例 四.改变药物组织分布的方法 一.为什么要进行药物组织分布研究？ 1.药物在组织中的浓度与药理效应直接相关：药 理效应取决于靶器官的浓度，药物的组织分布与药 理效应的产生更加密切。 2.药物在血液的浓度与药理效应间接相关：一般 认为，当药物在体内达到稳定状态时，血浆中药物 浓度与药物在作用点的浓度紧密相关，即血浆中的 药物浓度反映了药物在体内（靶器官）的状况，因 而血浆浓度可作为作用部位药物浓度的可靠指标。 二. 实验方法 （一）基本要求 （二）分析方法的验证 （一）基本要求 1. 动物的选择 小鼠 大鼠 注：药动学研究的动物选择：与药效一致 2.给药剂量 选择一个剂量（一般以有效剂量为宜）给药 注意：药动学研究需高、中、低三个剂量 3.时间点的选择 1)至少吸收相、分布相和消除相各取一个点 2)上升相、下降相 3)静脉注射 注意：每个时间点至少应有5只动物的数据 。 4.检测样品的选择 1）心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉 2）子宫或睾丸 3）效应靶器官、毒性靶器官。 5.样品的前处理 取样：各组织器官用滤纸吸干残留血，生理氯化钠溶液充分冲洗，用滤纸吸干，称重，分别取各组织1g（不足1g，取全量），加四倍量的生理盐水匀浆。 前处理：去除蛋白质；可使结合型的药物释放出来，以便测定药物的总浓度；其方法有有机溶剂 、盐析、加酸等。 （二）分析方法的验证 生物样品的特点： 1）取样量少 2）药物浓度低 3）内源性物质干扰 4）个体差异大 基本参数 生物样品分析方法的基本参数包括： 1.准确度 2.精密度 3.特异性 4.灵敏度 5.重现性 6.稳定性 1.特异性 特异性：分析方法测量和区分共存组分中分析物 的能力。这些共存组分可能包括代谢物、杂质、分 解产物、介质组分等。内源性物质和其他代谢物不 得干扰样品的测定。试验报告(论文)中应提供: 1）被试验药物标准样品的色谱图 2）正常生物样品（空白匀浆液）的色谱图 3）空白生物样品（匀浆液）外加被试药物的色谱图 4）给药后的生物样品的色谱图 2.标准曲线与定量范围 标准曲线：试验响应值与分析物浓度间的关系。根据所 测定物质的浓度与响应的相关性，用回归分析方法（如用加 权最小二乘法）获得标准曲线。标准曲线高低浓度范围为定 量范围，在定量范围内浓度测定结果应达到试验要求的精密 度和准确度。 用至少5个浓度建立标准曲线，应使用与待测样品相同的 生物介质，定量范围要能覆盖全部待测浓度，不允许将定量 范围外推求算未知样品的浓度。建立标准曲线时应随行空白 生物样品，但计算时不包括该点。 检测限 定量限 3. 精密度 要求选择3个浓度的质控样品同时进行方法的精密 度和准确度考察。低浓度选择在定量下限附近，其 浓度在定量下限的3倍以内；高浓度接近于标准曲线 的上限；中间选一个浓度。每一浓度每批至少测定5 个样品，为获得批间精密度，应至少连续3个分析批 合格。 精密度用质控样品的批内（天内）和批间（ 天内 ） 相对标准差（RSD）表示，相对标准差一般应小 于15%，在定量下限附近相对标准差应小于20%。 分析批：包括待测样品、适当数目的标准样品和质控样品的完整系列。一天内可以完成几个分析批，一个分析批也可以持续几天完成。 质控样品：即QC样品，系指在生物介质中加入已知量分析物配制的样品，用于监测生物分析方法的重复性和评价每一分析批中未知样品分析结果的完整性和正确性。 标准样品：在生物介质中加入已知量分析物配制的样品，用于建立标准曲线，计算质控样品和未知样品中分析物浓度。 4. 准确度（方法回收率） 准确度：在确定的分析条件下，测得值与 真实值的接近程度。 准确度一般应在85%～115%范围内，在定量 下限附近应在80%～120%范围内。 5. 定量下限 定量下限是标准曲线上的最低浓度点，要求至少能满足测定3～5个半衰期时样品中的药物浓度，或Cmax的1/10～1/20时的药物浓度，其准确度应在真实浓度的80%～120%范围内，RSD应小于20%。应由至少5个标准样品测试结果证明 6. 样品稳定性 目的：确定生物样品的存放条件和时间。 方法： 1）生物样品在处理前,室温、4℃放置放置的稳定性。 2）生物样品经处理后,待测样品放置一定时间的稳定性 3）多次冻-融的稳定性：用来考察生物样品经较 长时间的低温存放的稳定性,以确定质控样品能否长 期存放。 7.