2017整理一章分子生物学绪论.ppt

本章主要内容 一、分子生物学的基本含义 二 、分子生物学研究内容 （一）DNA重组技术 目的是将不同DNA片段（如某个基因或基因的一部分）按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响 受体细胞的新的 遗传性状。 DNA重组技术 （二）基因的表达调控 信号转导研究 转录因子研究 真核基因结构的不连续性 RNA剪辑 （三）生物大分子的结构功能研究 生物大分子在发挥生物学功能时，必须具备两个前提： A 它拥有特定的空间结构（三维结构） B 在它发挥生物学功能的过程中，必定存在着结构和构象的变化。 基因组:一个细胞（或生物体）内所有基因的组合 功能基因组学：研究基因组内每个基因的具体功能及其相互关系 蛋白质组计划：后基因组计划，研究蛋白质的组成、功能 生物信息学：以计算机为工具对生物信息进行储存、检索和分析 三、分子生物学简史 （一）准备和酝酿阶段 产生了两点对生命本质的认识上的重大突破：即确定了蛋白质是生命的主要物质基础和生物遗传的物质是DNA。 蛋白质是生命的主要物质基础 　1897年，Buchner兄弟用不含细胞的酵母 提取液，实现了发酵，提出酶是生物催化剂。 　1902年Email Fisher证明蛋白质结构 是多肽。 1953年Sanger和Thompson完成了第一 个多肽分子 --胰岛素A链和B链的氨基酸 全序列分析。 1950年Pauling和Corey提出了α--角 蛋白的α－螺旋结构模型。 　　 （二）现代分子生物学的建立和发展阶段 1 中心法则的建立和完善 2 蛋白质结构与功能的深入研究 品种改良 转基因猪 ? 生长激素基因 ? 人的血红蛋白基因 提高畜牧业的生产力发展水平 分子生物学在兽医中的应用 分子生物学技术在中兽医基础理论中的应用 阴阳学说与分子生物学技术 阴阳学说贯穿于中兽医学理论体系的各个方面。对分子生物学的主要研究对象核酸和蛋白质及与其密切相关的细胞核和细胞质进行了阴阳属性的划分。核酸属阴，蛋白质属阳；胞核属阴，胞质属阳。 近几年来，我国对cAMP、cGMP与中兽医阴阳学说进行了研究。李芳生…报道，阳虚者cAMP水平升高；阴虚者cGMP水平升高。进一步分析cAMP、cGMP与阴虚和阳虚的关系可知，阳虚者表现副交感神经系统活动加强；阴虚者主要表现交感神经系统活动加强。这些研究都为推动中医理论向现代化迈进有重要意义。 《素问·至真要大论》中说“谨察阴阳所在而调之，以平为期”，是中医临床诊断和治疗的基本原则。与此理论相一致，分子生物学技术研究发现，正常细胞染色体上存在非活化状态的原癌基因，同时还存在抑癌基因。如前者激活，基因异常表达；或后者缺失而不能发挥正常细胞生长调节和终止分化作用，就可导致肿瘤发生，这说明原癌基因与抑癌基因两者平衡失调对肿瘤发生起着重要作用。 脏腑学说与分子生物学技术 脏腑学说是研究动物机体各脏腑器官的生理活动、病理变化及其相互关系的学说。 肾藏精，主命门之火，是机体的先天之本。杨金蓉运用“恐伤肾”原理恐吓母鼠，造成子鼠先天肾气亏虚的动物模型，然后检验子鼠胸腺核酸含量，发现恐吓各组DNA、RNA含量及RNA／DNA值均有所降低，且恐吓程度越重，降低越明显。王米渠报道受惊吓母鼠所产子鼠大脑皮层厚度变薄，尤以分子层明显变薄，说明围产期紧张情绪直接影响到下一代子鼠的生长发育。用RT—PCR技术发现肾阳虚证和下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素的mRNA表达受抑，将肾阳虚证定位在下丘脑。脾统血，主运化，是机体的后天之本。王晓明等通过脾气虚证大白鼠模型及其相关抗氧化酶变化研究，提示中医认为“脾为后天之本”在生理上同分子生物学水平的抗氧化酶活性和(含量)的正常，对中医“脾”的本质的现代化科学解释有一定的学术意义。这一切都说明中医脏象学说是有分子生物学基础的。 中兽医证的研究与分子生物学技术 中兽医中的同病异治、异病同治在分子生物学上的体现就是将同一疾病不同证候和同一证候不同疾病的动物进行基因图谱表达，观察分析其基因突变、异常表达同疾病的关系。从中西医结合的角度，中医证本质的含义是指引起证发生发展的物质基础，这些物质决定着证的动态变化过程。 分子生物学对于蛋白质研究的突破将为证候与蛋白质的结合研究奠定基础，在这一方面，有关蛋白质芯片的深入研究和纳米技术的使用将为蛋白质的研究与中医证候的研究提供发展的契机。而证候一基因组学也是中医现阶段研究的一个重要课题，将宏观的中医证候与微观的基因功能相联系。为中医证候的现代化研究提供了新的探索路径。 发现“阳虚”动物骨髓细胞DNA合成率下降，认为中