2017整理体细胞胚胎发生和人工种子.ppt

教学目的和要求 掌握愈伤组织的发生方式； 掌握人工种子的定义； 掌握人工种子的制备。 第一节 愈伤组织和体细  胞胚胎发生 体细胞 胚 胎发生(Somatic embryogenesis) 是指单倍或双倍的体细胞或单个花粉在特定的条件下，未经性细胞融合而通过与合子胚胎发生类似的途径，即通过原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期，发育成新个体的形态发生过程，这种类合子胚结构称胚状体或体细胞胚(Somatic embryo). 1.非胚性愈伤组织的悬浮细胞 　 2.胚性愈伤组织的悬浮细胞 　 3.球形胚 　 4.心形胚 　 5.鱼雷胚 　 6.子叶胚 　 7.愈伤组织表面具早期体细胞胚 愈伤组织（callus）指从外植体的内部或切口表面形成的一团没有分化的均一一致、无序生长的薄壁细胞团。这种组织具有再分化的能力。 一、愈伤组织的诱导 起动期 分裂期 形成期 起动期:植物准备分裂的时期； 特征：细胞大小无明显变化；RNA含量迅速明显增加；细胞核变大。 分裂期：细胞通过一分为二的方式不断增生子细胞的过程。 特征：细胞分裂快、结构疏松、缺少组织结构 形成期：外植体细胞经过诱导、分裂形成了无序的愈伤组织的时期。 细胞特点：细胞大而不规则、高度液泡化、无次生细胞壁和胞间连丝，整个组织结构比较松散；表面以下5～10个细胞是细胞生长的中心，分生中心的细胞明显小些，出现了胞间连丝和果胶质，这些中心是愈伤组织的主要生长部位。随着愈伤组织表层细胞分裂的减缓和停止，内部深处的生长中心细胞不断分裂并形成像维管束或类似分生组织的鸟巢状结构。 二、愈伤组织器官的发生 不定芽方式 胚状体形成的方式 不定芽方式（adventitious bud type）是指愈伤组织培养物，通过形成不定芽再生成植株。这是愈伤组织中常见的器官发生方式。 愈伤组织通过不定芽方式再分化形成再生植株的方式主要有四种： 1、在愈伤组织上分别形成根或芽器官，即形成无根的芽或无芽的根； 2、在愈伤组织上先产生芽，待芽伸长后再在其茎的基部长出根而形成小植株，多数植物属于此种方式； 3、在愈伤组织上先产生根，再从根基部分化出芽而形成小植株，双子叶植物多属此种情况； 4、先在愈伤组织的不同部位分别形成根和芽，然后两者结合起来形成一株小植株，只有根和芽的维管束是相通的才能得到成活的植株。 胚状体形成（embryoid formation）是指从培养的组织或细胞中直接或间接形成胚胎的生长方式。 直接形成胚胎是指在外植体上直接分化出胚状体； 间接形成胚胎是指在外植体上先分化出胚性愈伤组织，然后由胚性愈伤组织再分化形成胚状体 体细胞胚的发生方式： 胚状体可由表皮细胞、愈伤组织、悬浮细胞、花粉、原生质体等发生： 1、来源于外植体的表皮细胞； 2、来源于愈伤组织细胞； 3、悬浮培养中由单细胞来源的胚状体 4、由花药花粉培养产生的单倍体胚状体； 5、来源于原生质体的胚状体。 人工种皮需要满足的条件： 1、具有一定的透气性，不能影响胚状体的呼吸； 2、具有一定的硬度，经得起种子储存和运输中的挤压和机械播种中的磨损； 3、易于降解； 4、含有其他有利于胚状体存活、生长的成分。 B. 体细胞胚包裹的材料： 凝胶 可以使人工种皮具有柔软性，不仅适于胚状体的要求，而且具有抗压性。 制作过程 （2）人造胚乳的研制 人造胚乳即包裹胚状体的营养基质，其外部就是人工种皮。 人工胚乳的成分 人工胚乳的主要成分为无机盐、碳水化合物、蛋白质等营养物质。 人工胚乳的制作 直接法 在凝胶中直接加入大量元素、碳水化合物及防病用抗生素。 微型包裹法 将碳水化合物和大量元素包裹在微型胶囊内，然后再把微型胶囊和种胚一起包裹在海藻酸钠中。 黄连 苜蓿 马铃薯的人工种子 思考题 如何实现体细胞胚的同步发育？ 什么是人工种子？它是如何构建的？ 现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种成功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。 2、植物组织培养的应用： （4）人工种子的转换 转换是指由体细胞胚发育成具正常表现型的绿色植株的能力，转换率用来表示不同发育阶段的体细胞胚发育为小植株的比率。 二、人工种子的优越性与局限性 （一）、优越性 1、通过植物组织培养技术生产的胚状体具有数量多，繁殖速度快，结构完整等特点，可短期内大量生产优良种苗，比茎尖培养繁殖速率还高。 2、大量人工种子来源于同一植株的体细胞，不存在遗传变异的问题,渴望获得整齐一致的植物苗，利于农业生产的规范化、标准化和机械化管理。 3、为一些不能采用种子繁殖的园艺植物开辟了良好的良种繁育新途径。 （二）、局限性 1、一些具有重要性状的植物目前发生体细胞胚的能力较弱，再生系统尚不健全，难以形成有活力的胚