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微生物学Microbiology 三峡大学 ● 化学与生命科学学院 The College of Chemistry and Life Science Three Gorges University 第8章 Chapter 8 微生物的遗传 Microbial Genetics Chapter8 -1- 遗传的物质基础 一、3个经典实验 （Three traditional tests） 1、转化（transformation） 2、噬菌体感染实验 3、植物病毒的重建实验 二、遗传物质的存在方式 三、质粒（plasmid） Chapter8 - 2 - 基因突变（Gene Mutation） 一、突变类型 （Types of mutation） 1、按突变发生的原因（based on reason） 2、按碱基成分改变的情况 （based on bases changing） 3、按突变体表型特征的不同 （based on characteristic of phenotype） 二、基因突变的特点 三、突变的机制 （Mechanism of gene mutation） 1、互变异构效应 2、诱变剂（mutagen）的影响 3、诱变剂与致癌物质 —— Ames试验 四、DNA损伤的修复 （Reparation of DNA） 1、光复活作用（photoreactivation） 2、切除修复（excision repair） 五、突变与育种 （Mutation and Breeding） Chapter8 -3- 基因重组（Gene Recombination） 基因重组的方式 1、转化（transformation） 2、接合（conjugation） 3、转导（transduction） 4、原生质体融合 Chapter8 -4- 基因工程（Genetic Engineering） Chapter8 -5- 菌种保藏（Culture Preservation） 一、菌种的衰退和复壮 二、菌种保藏 （3）插入染料（intercalating dye） 结构和一个碱基对相似，能插入两个碱基对之间在DNA复制时导致碱基对的缺失或增添。如溴化乙锭和吖啶橙。 （4）辐射和热（radiation and heat） 如紫外线形成胸腺嘧啶二聚体，在DNA修复中导致突变； 热引起碱基的化学反应导致错配； 此外，强烈的理化因子、转座因子还会导致染色体大段损伤，如倒位、重复、插入等。 很多种化学物质，能以各种机制导致DNA的突变，因此可以被利用来获得各类遗传突变，进行诱变育种，还能对有害微生物进行控制，但同时，这些物质也危害人类自身的健康。 人物：美国加利福尼亚大学，Bruce Ames 材料：鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhmurium） 组氨酸营养缺陷型菌株（his-） 艾姆氏试验（Ames test）：是一种利用细菌营养缺陷型的回复突变来检测环境或食品中是否存在化学致癌剂的简便有效的方法。 艾姆氏试验 DNA损伤的类型很多，机体对其修复的方法也各异，比如有些DNA聚合酶本身就有3’→5’的外切酶活性。机体主要的修复方式有：光复活作用、暗修复作用、重组修复和SOS修复。 光复活作用：把经过紫外线照射后的微生物暴露在可见光下时，就可出现明显降低其死亡率的现象。 可见光 紫外光 T T 光解酶 条件：可见光，光解酶 切除修复：又称暗修复（dark repair），是一种不依赖可见光，只通过酶切作用除去损伤部位，随后又重新合成一段正常DNA链的修复方式。 条件：内切核酸酶、外切核酸酶、 DNA聚合酶、连接酶 自发突变 生产中选择 定向培育 诱发突变 出发菌 诱变条件 筛选方案 诱变剂种类 诱变剂量 样品处理：表型延迟 琼脂块培养法 梯度平板法 夹层平板法、影印平板法 限量补充培养法 春日霉素产生 菌的孢子悬液 诱变 含供试菌种 （拮抗对象）的琼脂平板 琼脂块培养法 抑菌圈 检查 两个独立基因组内的遗传基因，通过一定的途径转移到一起，形成新的稳定的基因组的过程，称为基因重组，是遗传物质在分子水平的杂交。 接合：细胞与细胞的直接接触（F因子介导） 转导：由缺陷噬菌体介导 转化：游离DNA分子 + 感受态细胞 原生质体融合：双亲细胞 准性生殖 有性生殖 转化（transformation） ：受体菌（receptor）直接吸收供体菌（donor cell）的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象。通过转化方式形成的杂种后代称为转化子（t